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背景:隆乳术是目前最常见的整形外科手术,主要用于乳房美容和重建。硅胶乳房假体是最常选择的隆乳材料,主要由硅橡胶外壳和内部的硅凝胶构成,根据硅橡胶外壳的表面纹理将其分为光面假体和毛面假体。假体植入人体后通常会引起异物反应(FBR),导致其周围胶原纤维沉积并形成包膜。而过度的FBR会引发包膜挛缩(CC),表现为乳房变硬、疼痛和明显畸形,严重时需再次手术。CC是硅胶乳房假体隆乳术后最主要的并发症。研究认为表面纹理在假体-乳房组织相互反应中发挥关键作用,并影响CC的形成。然而,围绕光面及毛面假体在减少CC优势方面的争议仍然存在。基于上述问题,我们设计了本研究。首先,我们采用同一公司已上市的三种具有相同本体特征和不同表面纹理的硅胶乳房假体,对其硅橡胶外壳表面进行物理特性检测,以明确三种材料的表面特征差异。而后通过细胞实验来探究不同硅橡胶材料表面纹理对成纤维细胞生物学行为的影响。最后,我们对动物实验中的包膜组织进行影像学、组织学及免疫组织化学评估,以探究不同硅橡胶材料表面纹理对包膜形成的影响。这些结果将为表面纹理与临床结局之间的相关性提供独特见解,从而更好地理解表面纹理在假体临床性能中所发挥的作用,为临床实践提供实验依据。目的:研究不同硅橡胶材料表面纹理对成纤维细胞生物学行为和包膜形成的影响。方法:1.材料准备及分组(1)裁剪:将三种硅胶乳房假体的硅橡胶外壳分别裁剪成96孔板、24孔板和6孔板孔径大小的圆片(用于细胞实验)以及直径1 cm的圆片(用于表面特征检测和动物实验)。(2)消毒:各硅橡胶圆片依次于75%酒精中浸泡过夜、无菌PBS中浸泡2 h,而后晾干备用。(3)分组:光滑表面组、粗糙表面1组和粗糙表面2组。2.不同硅橡胶材料表面特征检测(1)表面形貌:使用聚焦离子束扫描电镜(FIB-SEM)检测材料表面微观形貌。(2)表面粗糙度:以平均粗糙度(Ra)为评价指标,使用激光共聚焦显微镜进行检测。(3)亲疏水性:以水接触角(CA)为评价指标,使用接触角测量仪进行检测。3.人成纤维细胞在不同硅橡胶材料表面上的生物学行为评价(1)细胞增殖活性:将成纤维细胞分别接种至各组材料表面,利用CCK-8法检测其培养24 h及48 h后的细胞活性。(2)细胞粘附能力:成纤维细胞在各组材料表面培养48 h后,通过蛋白质印迹法(WB)检测粘着斑激酶(FAK)及四种代表性的粘着斑特征蛋白(Talin、Zyxin、Vinculin、Paxillin)的表达情况。(3)细胞形态:使用FIB-SEM观察成纤维细胞在各组材料表面培养48 h后的形态变化。(4)细胞骨架组织:对各组材料表面培养48 h后的成纤维细胞进行免疫荧光染色,并使用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架组织情况。4.不同硅橡胶材料表面对大鼠体内包膜组织形成的影响(1)实验分组:选取5只雌性SD大鼠,每只大鼠植入三组材料,每组5个标本。(2)手术实施:在每只大鼠背部皮下分别植入三种硅橡胶圆片,6周后取出包膜组织。(3)影像学观测:取组织标本前,利用超高分辨率超声(HR-US)检测包膜组织的回声强度,并量化其灰度值。(4)组织学观测:对组织标本进行HE染色以检测包膜厚度,通过Masson染色对包膜中胶原纤维排列及密度进行评估。(5)免疫组织化学评价:对组织标本进行免疫组织化学染色,以评估a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达情况。结果:1.表面特征检测结果显示,光滑表面材料Ra值(1.35±0.13μm)最小,CA值为110.20±2.53°,其表面基本光滑平整;粗糙表面1材料Ra值(18.81±0.57μm)其次,CA值为134.60±0.82°,其呈现出极其不规则的形貌;而粗糙表面2材料Ra值(43.66±0.72μm)最大,CA值为119.80±2.36°,其具有两级形貌特征,第一级为规则分布的半球形凸起结构,第二级为山脊样突起结构。三种硅橡胶材料的Ra值或CA值之间均具有显著性差异(P<0.01)。2.CCK-8检测结果表明,培养24 h后,成纤维细胞的细胞活性在所有材料组中无明显统计学差异(P>0.05)。培养48 h后,两种粗糙表面组的细胞活性均显著高于光滑表面组(P<0.01),而在两个粗糙表面组之间,细胞活性无明显统计学差异(P>0.05)。3.WB蛋白显影条带及灰度值定量结果显示,随着Ra值的增加,成纤维细胞在材料表面上各粘附相关蛋白的表达逐渐降低。4.FIB-SEM观察表明,成纤维细胞的形态随着材料表面Ra值的减少而逐渐舒展。5.激光共聚焦显微镜观察表明,成纤维细胞骨架的组织排列随着材料表面Ra值的增加而变得逐渐紧凑、平行。6.动物实验结果显示,材料表面的Ra值越大,包膜回声强度越弱,包膜组织越厚,包膜中胶原纤维排列越稀疏、絮乱,a-SMA表达越少。结论:1.三种硅橡胶材料在表面形貌、Ra值与CA值等表面特性方面具有显著差异。2.不同硅橡胶材料表面纹理对成纤维细胞增殖、粘附、形态、骨架组织及大鼠体内包膜形成的影响与其表面Ra值密切相关。3.总体上,具有规则分布和两级形貌特征、最大Ra值及疏水性适中的粗糙表面2材料可能更利于减弱包膜组织的收缩性。