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目的：明确Crif1促进骨肉瘤细胞辐射损伤抵抗并探讨其可能的分子机制。方法：1.免疫组化检测骨肉瘤组织及放射敏感性较强的肺癌组织的Crif1表达情况，定量PCR、Western Blot方法检测骨肉瘤细胞株U2OS、其他肿瘤细胞株HepG2(肝癌)、PLC(肝癌)、A549(肺癌)、Jurkat(白血病)以及骨髓间充质干细胞BMSCs、肾小管上皮细胞株HK2中Crif1基因及蛋白表达，初步阐明Crif1与细胞辐射敏感性之间的联系。2.体外模拟细胞辐射损伤，RNAi慢病毒载体感染U2OS细胞，抑制Crif1基因表达，CCK8方法检测辐射前后细胞增殖情况，流式及TUNEL法检测辐射前后细胞凋亡，证实Crif1在U2OS细胞辐射损伤抵抗中的作用。3.流式检测辐射前后U2OS细胞周期分布，通过构建Crif1及CDK2原核表达载体，并进行GST pull down实验验证两者之间的相互结合，免疫荧光观察CDK2辐射前后细胞亚定位，研究Crif1可能CDK2途径调控细胞周期参与U2OS辐射损伤抵抗。4.流式及免疫荧光检测U2OS辐射前后细胞ROS累积，同时通过定量PCR及Western Blot方法检测辐射前后Crif1、Nrf2基因及蛋白表达，并通过定量PCR检测NRF2下游II相解毒酶相关基因HO-1、GSTA、GCLC表达，研究Crif1保护U2OS免于辐射损伤可能与其调控氧化应激有关。结果：1.免疫组化研究结果发现，Crif1在骨肉瘤组织中的表达显著高于肺癌组织；在所研究的7种不同细胞系中，Crif1基因在骨肉瘤细胞株U2OS中表达明显高于其他细胞(p＜0.01)。以U2OS细胞Crif1基因表达为1，其他细胞株相对表达量由高至低分别为BMSCs0.48±0.05、PLC0.19±0.02、HepG20.14±0.02、HK20.08±0.01、A5490.05±0.007、Jurkat0.02±0.005，蛋白表达水平与mRNA水平一致。2.4Gy辐射条件下，U2OS细胞增殖受到抑制，干扰Crif1表达，抑制加剧。9Gy辐射能够诱导U2OS细胞凋亡，干扰Crif1表达后，凋亡率增加更为显著，且随着时间增加而增加(0h5.43±1.52%，24h31.67±4.28%，48h44.30±7.54%，p＜0.01)。3.9Gy辐射诱导U2OS细胞出现G0/G1期阻滞(对照组0h48.8±4.72%，24h55.32±6.17%，48h56.58±6.22%，p＜0.05；空病毒组0h48.2±3.98%，24h52.63±5.77%，48h57.90±7.18%，p＜0.05)，干扰Crif1表达，能部分抑制辐射诱导的G0/G1阻滞(0h33.17±3.25%，24h33.28±3.38%，48h34.91±4.01%，p＞0.05)。GST pull down实验证实，Crif1能够直接与CDK2结合。辐射后，能观察到明显的CDK2核转位，抑制Crif1表达后，CDK2核转位明显减少。4.9Gy辐射后U2OS细胞产生大量ROS，Crif1与Nrf2及下游II相解毒酶HO-1、GCLC、GSTA的表达显著升高，而干扰Crif1表达后，ROS产生增加，Nrf2及下游基因表达未见明显升高。结论：1. Crif1在骨肉瘤组织及U2OS细胞中的高表达可能与其辐射损伤抵抗有关。2.体外辐射实验证实，干扰Crif1之后，能够抑制U2OS细胞增殖，促进凋亡，增强U2OS细胞辐射敏感性。3. Crif1可能通过直接与CDK2作用，介导其核转位调控细胞周期，诱导U2OS细胞G0/G1期阻滞抵抗辐射损伤。4. Crif1可能通过NRF2通路调控氧化应激，促进U2OS细胞辐射损伤抵抗。