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CD44(cluster of differentiation)是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白，在淋巴细胞、成纤维细胞和上皮细胞表面均能检测到它的表达，最早由Dalchau等于1980年用单克隆抗体技术检测到并确定，曾被许多学者称为Pgp-1、ECM-和透明质酸受体等。 我们应用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测胃癌患者骨髓血和外周血中CD44v6mRNA的表达；应用定量酶链免疫吸附试验(ELISA)和免疫组织化学(S-P)法检测胃癌患者外周血清中可溶性CD44v6(sCD44v6)的浓度和胃癌组织中CD44v6蛋白的表达；应用荧光定量RT-PCR(FQ-RT-PCR)法检测胃癌患者手术前后外周血中CD44v6mRNA的实时定量表达，探讨并分析CD44v6基因在胃癌发生、发展过程中的作用。 目的 检测胃癌患者外周血(骨髓血)中／胃癌组织中CD44v6mRNA／CD44v6蛋白的表达，观察分析它与胃癌临床病理之间的相关意义，分析CD44v6基因与胃癌发生、发展的关系，探讨以CD44v6基因来判断胃癌侵袭转移能力的可能性和方法。 方法 应用半定量RT-PCR、荧光定量RT-PCR法、定量ELISA法、及免疫组化S-P法检测胃癌患者外周血及部分胃癌患者手术后外周血中CD44v6mRNA、sCD44v6和胃癌组织中CD44v6蛋白的表达。 结果 1．38例有淋巴结转移的胃癌患者外周血中35例CD44v6mRNA表达阳性，表达率92.10％，而无转移的8例患者外周血中仅4例CD44v6mRNA表达阳性，表达率50％，两者比较有显著性差异；34例较晚期(Ⅲ-Ⅳ) 南京医科人学博十学位论文胃癌患者外周血中 32例有 CD44v6m洲A表达阳性，表达率为 94．12，而较早期门－I）12例中仅7例有表达，表达率58．33o，两者比较有显著性差异；32例弥漫型胃癌患者外周血中30例CD44v6m洲A表达阳性，表达率 93尸5％，而肠型胃癌中 14例有 9例 CD44v6mMA表达阳性，表达率 64．2 8％。两者比较有显著差异；至于肿瘤大小方面，表达率比较无显著差异。 2．20例胃癌患者术前外周血都检出有CD44v6mRNA基困表达，表达强度在4．gX 10’－3．ZX10’拷贝／XgRNA之间，20例患者CD44V6RNA平均表达量为 3．gX10‘拷贝／ug RNA，20例患者根治性手术后外周血中CD44v6mRNA白表达强度为 5．5。10’－7＊xlo‘拷贝／ug NA，平均二．4xlo’拷贝／ug RNA，寸治性手术切除术后外周血中CD44v6mRNA表达强度明显下降，两者比较P叱刀1，有显著性差异。 3．胃癌患者外周血血清中可溶性CD44V6（SCD44VV6含量明显高于正常对照组；胃癌组血清中SCD44V6含量明显高于胃溃疡组；根治性胃癌患者术后外周血血清中叽D叩V6含量明显下降，术后和术前比较有显著性差异，而不能行根治性手术的患者外周血血清中SCD44V6含量与术前相比无显著性差异。SCD44V6浓度表达和肿瘤病灶大小无相关性，两种病理分型中表达有显著性差异；在有无淋巴结转移组中表达有显著差异；在肿瘤病程进展方面，表达有显著性差异。 4．胃癌组织中 CD44V6蛋白表达率为 78．57O。52例较晚期（Ill－IV）胃癌组织中有50例表达CD44V6蛋白，表达率为96．lO，而18例较早期门n期）胃癌组织中仅5例有表达，表达率为27．78地两者比较有明显性差异；65例有淋巴结转组中有引例表达 CD44V6蛋白，表达率78．46％，而5例未转移组中仅2例有表达；表达率为4O％，两者比较有显著性差异；29例肠型胃癌组织中 16例有 CD44V6蛋白表达，表达率55．17o，k 41例弥漫型胃癌组织中 39例有表达，表达率达95．120，两者比较有显著性差异；在 49例＞scm胃癌组织中有 40例表达 CD44v6蛋白，表达率sl．36o，21例 scm胃癌组织中仅有15例表达，表达率为 71．43O，两者比较，无显著性差异。 5 南京医科人学博十学位论文结 论 l．胃癌患者外周血中存在CD44v6m洲A表达。CD44v6m叫A表达与淋巴结转移显著相关；和肿瘤病理分期显著相关；和病理分型显著相关；而和肿瘤大小无相关性。RT干CR方法敏感、特异性较高。 2．胃癌患者外周血中存在CD44v6mMA表达，根治性手术后外周血中CD44v6mRNA比手术前明显下降，两者比较存在显著性差异。实时定量 PCR方法精确性好，敏感性、特异性都高。 3．胃癌患者外周血清中SCD44V6含量可作为胃癌负荷的标志。根治性手术后患者外周血清中 SCD44V6显著下降，而非根治性手术后患者外周血清中 SCD44V6则下降不明显或反而升高；外周血清中 SCD44V6含量和淋巴结转移显著相关；和肿瘤病理分型显著相关；和肿瘤病期进展显著相关；而和肿瘤大小无相关性。定量 ELI SA简便实用、费用低廉、比较敏感。 4．胃癌组织中有CD44V6蛋白表达。CD44V6蛋白表达和肿瘤淋巴结转移显著相关；和肿瘤病理分型亦显著相关；和肿瘤病理跟显著相关；而和肿瘤大小无相关性。SF免疫组化法快速简练?