微流体数字化细胞显微注射实验研究

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生物技术的发展以及细胞注射技术的广泛应用,对实验手段和实验设备提出了越来越高的要求。比如,设备操作的容易程度、设备对微操作对象的影响大小、微注射量的控制精度等问题。在细胞注射过程中,对微操作要求迅速准确,注射速度快;细胞刺膜过程对细胞的变形影响小、微注射量一般要求达到pL级。目前还没有相关设备和手段来完全解决这些问题,南京理工大学微系统研究室提出的“微流体数字化技术”在这方面取得了突破性进展。本文是针对数字化细胞微注射仪的细胞注射实验研究,该注射仪是基于“微流体数字化技术”研发的。利用微系统研究室研发的细胞工程用微针制备仪器,在大量制备微针实验的基础上,制作出符合细胞注射要求的微针。对微针进行表面疏水化以及清洗处理,可以提高微注射针的注射性能;利用图像处理技术可以精确测出其物理参数。此外,对数字化微注射仪的进针、退针性能进行测试;重点研究了注射仪的注射性能,得到不同参数下的注射量,并对其影响因素进行分析。在此基础上,对三种具有代表性的卵细胞进行微注射操作,通过实验探索注射驱动参数,得出注射成功率较高的参数范围。最后对注射过荧光标记物的细胞进行荧光检测,证实微注射仪确实将注射药液注入细胞内。
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