莪术水提物对缺血性脑卒中的治疗作用及其机制研究

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目的:研究莪术水提物对大鼠缺血性脑卒中的治疗作用,探究其作用机制,为莪术的临床应用提供药理学依据,拓展莪术的临床用途。方法:健康成年雄性SD大鼠60只,体重260±20g,随机分为6组,每组10只,分别为假手术对照组、模型对照组、尼莫地平组、莪术高、中、低剂量组。除去假手术对照组,其余组大鼠均采用线栓法制作大鼠大脑中动脉梗阻(MCAO)模型。各组大鼠在造模前预防性给药7次,造模成功后给药3次,各组大鼠均按体重灌胃给药,每天一次。莪术高、中、低剂量组大鼠的给药剂量分别为16g/kg、8g/kg、4g/kg(分别为最大耐受量的1/5、1/10、1/20)。尼莫地平组大鼠的给药剂量为20mg/kg(为临床常用剂量的10倍)。假手术对照组和模型对照组大鼠分别给予相同体积的蒸馏水。在给药完成后分别检测各组大鼠的脑含水量、脑梗死体积百分比,血清中谷氨酸、CK、LDH的含量以及脑组织匀浆中MDA、NO的含量和SOD、 NOS的活力。给药完成后各组大鼠指标的检测及其方法:1、给药完成后,各组大鼠均参照Longa评分标准进行神经行为学评分。2、完成给药后,各组大鼠麻醉处死,取出大脑,冠状切四刀,切成五片,将脑片置于2%TTC溶液中,37℃下避光染色。3、TTC染色完成后,10%甲醛溶液固定,用眼科镊仔细分离苍白区和非苍白区,分别称重,计算梗死区脑质量占全脑质量的百分比(%)作为梗死范围。公式为:梗死体积百分比(%)=苍白区重量/(苍白区重量+非苍白区重量)×100%。4、给药完成后,断头取脑,称重,得到脑湿重,然后将脑组织放入80℃恒温烤箱内,24h后称重,得到脑干重,根据脑湿重和干重,计算脑含水量。公式为:脑含水量%=(湿重—干重)/湿重×100%5、采集各组大鼠血清,用相应的试剂盒测定各组大鼠血清中谷氨酸、LDH的含量。6、给药完成后,各组大鼠断头取脑,分别制成10%脑组织匀浆,用相应的试剂盒分别测定脑匀浆中MDA、NO含量及SOD、NOS活性。7、10%甲醛溶液固定脑组织,制作病理切片,并在显微镜下观察实验各组大鼠脑组织实质与间质的病理变化。结果:1、神经行为学评分结果显示,与模型组大鼠相比,莪术高、中剂量组大鼠和尼莫地平组大鼠神经行为学评分明显降低,说明莪术能有效地降低MCAO大鼠的神经行为损伤,改善大鼠的偏瘫体征。2、TTC染色结果表明,与模型组大鼠相比较,莪术高、中剂量能明显的降低大脑中动脉阻塞大鼠的脑梗死面积,改善脑梗死状况。3、脑含水量结果显示,莪术高剂量组大鼠脑含水量显著降低,说明莪术高剂量能明显的减轻大脑中动脉阻塞大鼠的脑水肿状况。4、血液生化结果显示,与模型组相比较,莪术能够有效地降低MCAO大鼠血清中谷氨酸、CK及LDH的含量。5、脑组织匀浆液测定结果显示,与模型组相比较,莪术能降低脑组织中MDA、NO的含量,降低NOS活力,提高SOD的活力。6、病理结果表明,与模型组比较,莪术能有效地保护MCAO大鼠缺血部位的脑组织及神经细胞损伤。结论:莪术对大鼠缺血性脑卒中有一定的治疗作用,其机制可能与降低脑水肿、抗氧化、抗自由基、保护缺血区脑组织及抑制兴奋性氟基酸的释放,保护脑神经细胞有关。
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