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降血压肽是血管紧张素转化酶的抑制剂，可通过抑制人体血管紧张素Ⅱ的生成而达到降低血压的目的。降血压肽毒副作用低、降压效果明显、来源广泛，已成目前研究的热点。但是，蛋白质酶解制备的ACE抑制肽大多活性较低，这已成为酶法制备的ACE抑制肽研究与开发的瓶颈，Plastein反应修饰是改善多肽ACE抑制活性的新途径。本文以海地瓜蛋白酶解物为原料，探究Plastein反应修饰对ACE抑制活性的影响，并从Plastein反应修饰产物中纯化出高活性的ACE抑制肽，鉴定其序列结构。本文主要研究内容如下：1.采用复合酶酶解海地瓜体壁蛋白，得到具有降血压活性的酶解物，利用Plastein反应进行修饰，考察酶的种类、底物浓度、温度、酶添加量对Plastein反应的影响，得到不同修饰程度的产物，测定其ACE抑制活性。结果显示经过Plastein反应修饰后，显著提高了酶解液的ACE抑制活性。体系中游离氨基的减少量呈不规则变化，修饰产物的IC50值也呈不规则下降，其中反应1h和4h的修饰产物IC50值最低，分别是0.62mg/mL和0.75mg/mL。分析体系中游离氨基酸的组成，发现脯氨酸的结合能显著提高海地瓜体壁蛋白酶解物的ACE抑制活性。2.以海地瓜蛋白酶解物为原料，利用响应面法优化了Plastein反应条件，得到海地瓜蛋白酶解物Plastein反应最佳条件是：底物浓度40.71%、温度47.75℃、酶添加量2.47kU/g蛋白，该条件下反应6h后体系中游离氨基酸减少量为0.462mmol/g pro。3.在Plastein反应中添加外源Tyr、Pro、Trp、Phe和Leu，探究外源氨基酸存在下Plastein反应对ACE抑制活性的影响。在适宜条件下，改变反应时间得到不同程度的Plastein反应修饰产物，并测定它们的IC50值。结果表明，添加Pro的效果最佳，活性测定显示，ACE抑制活性随修饰程度呈不规则变化。1h（0.59mg/mL）和4h（0.63mg/mL）达到最低，相比酶解原液（0.89mg/mL）有显著提高（p＜0.05）。反应体系游离氨基酸分析表明，体系中游离脯氨酸在反应后显著降低，反应1h后从酶解原液的0.29g/（100mL）降低到0.23g/（100mL），4h降低到0.2g/（100mL），说明脯氨酸有可能结合到肽链中，从而显著提高了修饰产物的ACE抑制活性。4.利用Sephadex G-15凝胶柱层析、反相高效液相色谱等技术对Plastein反应修饰产物进行分离纯化，获得了两条降血压活性肽，其氨基酸序列分别为PNVA、PNLG，推断为Plastein合成的产物。化学合成活性肽PNVA、PNLG、NVA、NLG并测定其活性，结果显示，PNVA的活性（8.18μM）显著高于NVA的活性（12.69μM），PNLG的活性（12.16μM）显著高于NLG的活性（17.45μM）。Plastein反应修饰得到的含有脯氨酸的降血压肽的活性显著高于不含脯氨酸的肽（p＜0.05），说明脯氨酸的引入提高了其ACE抑制活性。