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生殖激素对动物生殖系统发育至关重要,特别是对于处在生长发育时期的动物。染料木素和蜂王浆因具有类雌激素效应而被认为内分泌干扰物,并引起广泛关注。幼龄雄性动物采食雌激素类似物可能引起机体生殖激素分泌紊乱,睾丸结构异常发育,进而造成动物繁殖障碍。当机体持续接触具有雌激素效应的食物,如植物性雌激素染料木素（GEN）等可通过干预下丘脑-垂体-性腺轴反馈调节影响睾丸功能,导致繁殖障碍。本研究通过饲喂试验,应用苏木素和伊红（HE）染色、电镜观察（TEM）、凋亡检测（TUNEL细胞凋亡检测）、免疫组织化学检测（IHC）、酶联免疫吸附测定（ELISA）、Real time-PCR等方法,探讨不同浓度染料木素和蜂王浆冻干蛋白对幼龄小鼠睾丸发育和形态结构的影响及其相关机制,为丰富生殖生物学理论和临床应用提供科学依据。主要研究内容如下:1.GEN对小鼠睾丸结构的影响为探究染料木素（GEN）对幼龄雄性小鼠生殖功能的影响,本试验在母鼠孕期（妊娠第7天）和哺乳期饲喂母鼠混有GEN的日粮。断奶时,饲喂仔鼠含有不同剂量的GEN日粮至35日龄。试验检测子鼠睾丸组织的质量,曲细精管的结构以及睾丸组织中相关生殖基因的表达。试验分组:对照组（CON）、低剂量染料木素组（LGE,40 mg/kg GEN）和高剂量染料木素组（HE,800 mg/kg GNE）。结果显示,35日龄时,LGE组小鼠体重、曲细精管直径、生殖上皮高度和睾丸生精评分显著高于CON组,而HGE组小鼠体重、曲细精管直径、生殖上皮高度和睾丸生殖评分显著低于CON组（P<0.001）;LGE组小鼠睾丸质量显著高于CON组,而HGE组睾丸质量显著低于CON组（P<0.05）;LGE组小鼠生殖细胞畸形率显著低于CON组,HGE组生殖细胞畸形率显著高于CON组（P<0.05）。基因表达的结果显示,与CON组相比,处理组（LGE和HGE）睾丸组织中ESR2基因表达显著提高（P<0.05）;处理组（LGE和HGE组）睾丸组织中CYP19A1表达显著高于CON组（P<0.001）;LGE组SOX9和BRD7的表达与CON组相比显著提高,HGE组SOX9和BRD7的表达与CON组相比显著降低（P<0.001）。以上结果提示,40 mg/kg GEN对小鼠睾丸的生长发育有促进作用,800 mg/kg GEN对睾丸的生长发育有抑制作用,基于睾丸组织相关基因的差异化表达,说明睾丸发育与摄取GEN含量的多少有关。2.MRJPs对小鼠睾丸结构的影响为探究蜂王浆冻干蛋白（Main Royal Jelly Proteins:MRJPs）对幼龄雄性小鼠生殖功能的影响,本试验分批检测了 7日龄（PND 7:Post natal days 7）、14日龄（PND 14）、21日龄（PND 21）和35日龄（PND 35）小鼠睾丸质量、生殖上皮高度、曲细精管直径等指标进行统计分析并进行生殖评分。试验分组:对照组（CON）、低剂量蜂王浆冻干蛋白组（L-RJ）、中剂量蜂王浆冻干蛋白组（M-RJ）和高剂量蜂王浆冻干蛋白组（H-RJ）,其中 L-RJ 组、M-RJ 和 H-RJ 组的分别饲喂 125mg/kg MRJPs、250mg/kg MRJPs和500 mg/kg MRJPs。结果显示,在PND 14和21,M-RJ组小鼠睾丸质量与CON组相比显著增加（P<0.05）,H-RJ组小鼠睾丸曲细精管直径与CON组相比显著减小（P<0.05）。在PND 35,M-RJ组睾丸的质量和生殖上皮高度与CON组相比显著增大,H-RJ组睾丸的质量、曲细精管直径,生殖上皮高度和生精评分与CON组相比显著减小（P<0.05）。以上结果表明,M-RJ对小鼠睾丸的生长发育有促进作用,H-RJ对睾丸的生长发育有抑制作用。3.GEN和MRJPs对小鼠生殖激素和生殖细胞凋亡的影响试验采用酶联免疫吸附测定（ELISA）和TUNEL凋亡检测的方法,分别对生殖激素和睾丸组织中生殖细胞凋亡进行检测分析。结果显示,在PND 35,LGE组小鼠血清睾酮（T）浓度与CON组相比显著提高（P<0.05）。在PND21,处理组（L-RJ、M-RJ和H-RJ）小鼠的FSH水平与CON组相比显著降低（P<0.05）;处理组小鼠（L-RJ和M-RJ）的E2水平与CON组相比显著降低（P<0.05）。通过TUNEL检测,试验发现在PND35,HGE组小鼠睾丸组织的生殖细胞凋亡数量与CON组相比显著增多（P<0.05）;而H-RJ处理组凋亡数量与CON组相比显著减少（P<0.05）,H-RJ处理使得睾丸生殖细胞凋亡数量增加。以上结果表明饲喂GEN和MRJPs等内分泌干扰物,动物机体内的生殖激素水平会受到不同程度的干扰且剂量过高会对生殖细胞的发育存在不利影响。