不同年份新会陈皮中黄酮类物质提取及生物学活性评价

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新会陈皮(Citrus reticulata‘Chachi’)是产于广东省江门市新会地区茶枝柑的干燥成熟果皮,作为传统药食同源中药材,兼具药用价值和食用价值。新会陈皮富含黄酮类化合物,尤其是多甲氧基黄酮(Polymethoxylated flavones,PMFs),具有抗炎、抗氧化、抗癌等多种生物活性。以往的研究提示我们,新会陈皮在老化过程中,其黄酮类成分将发生变化,但这种变化是否将引起其生物活性变化尚不清楚。因此,研究新会陈皮在老化期间的黄酮类成分变化情况、以及其生物活性变化情况与老化时间相联系,为揭示黄酮成分在新会陈皮老化过程中对生物活性的影响作用提供指导,为新会陈皮有针对性开发提供重要理论依据。本研究以广东省新会地区新会陈皮基地来源的2011年~2020年新会陈皮作为研究对象,通过响应面法优化得到超声辅助溶剂提取的最佳工艺条件,结合高效液相色谱法比较十年新会陈皮中黄酮类成分含量的变化情况;利用酿酒酵母模型评估不同年份新会陈皮抗氧化活性,利用人单核巨噬细胞THP-1评估不同年份新会陈皮抗炎活性。主要研究结果如下:(1)在单因素实验基础上,以新会陈皮总黄酮含量为响应值,通过响应面法得到了超声辅助溶剂提取的最佳工艺条件。结果表明以64%乙醇为提取溶剂,料液比为1:30 g/m L,提取时间为99min条件下,新会陈皮中总黄酮含量为6.013mg/g,实际提取含量为5.955 mg/g,相对误差为0.92%。最佳工艺条件可以应用于新会陈皮中总黄酮的提取。(2)经过方法学考察证实所建立的HPLC检测条件符合实验要求。新会陈皮在十年老化过程中芦丁成分随老化时间增加而减少,柚皮素和5-去甲基橘皮素在老化过程中含量变化不明显,川陈皮素、3,5,6,7,8,3’,4’-七多甲氧基黄酮、橘皮素、5-去甲基川陈皮素在老化过程中含量呈现随之增加的趋势。(3)通过酿酒酵母对2011年、2016年、2020年新会陈皮进行抗氧化活性比较。结果表明,新会陈皮能够显著地提高H2O2、CCl4应激下的酵母细胞存活率,降低脂质过氧化水平和细胞内过氧化水平,且抗氧化能力为2011年>2016年>2020年新会陈皮。(4)通过脂多糖(LPS)在人单核巨噬细胞THP-1上建立炎症模型,对2011年、2016年、2020年新会陈皮进行抗炎活性比较。结果表明,新会陈皮能够显著地下调炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的表达量,且下调能力随着新会陈皮老化时间的增加而增加,老化初期的新会陈皮似乎具有更好的抑制NF-kB通路中IκBα蛋白和P65蛋白磷酸化的能力,而老化后期的新会陈皮则更能抑制MAPKs途径中ERK1/2和P38磷酸化。
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