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种薯储藏期间及播种后烂种是近年来马铃薯生产中的一个突出问题,一直影响马铃薯种薯质量及农户种植的效益。本试验选取了青岛胶州地区外购的马铃薯种薯样本,对腐烂马铃薯种薯的病原菌物分离、鉴定及其致病性测定,并对其中分离的致病疫霉进行培养基筛选、及其交配型及线粒体单倍型进行了研究,得到了如下结果:
1.从腐烂马铃薯种薯中分离、纯化并鉴定,共得到了261株菌株,鉴定出致病疫霉(Phytophthora infestans)62株,占比23.75%,锐顶镰刀菌(Fusarium acuminatum)52株,占比19.93%,尖孢镰刀菌(F. oxysporum)43株,占比16.48%,立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)22株,占比8.43%,禾谷镰刀菌(F. graminearum)21株,占比8.04%,终极腐霉(Pythium ultimum)18株,占比6.90%,细极链格孢(Alternaria tenuissima)17株,占比6.51%,球炭疽菌(Colletotrichum coccodes)14株,占比5.36%,木贼镰刀菌(F. equiseti)7株,占比2.68%,产黄色镰刀菌(F. thapsinum)5株,占比1.92%,共计10种。通过对分离纯化的病原菌物的致病性测定,明确了由致病疫霉引起的马铃薯晚疫病和由部分镰刀菌引起的马铃薯干腐病为引起马铃薯腐烂的主要病害;同时发现致病疫霉(P. infestans)、锐顶镰刀菌(F. acuminatum)、尖孢镰刀菌(F. oxysporum)、禾谷镰刀菌(F. graminearum)、终极腐霉(P. ultimum)、细极链格孢(Alternaria tenuissima)这6种菌种可以引起马铃薯明显发病腐烂;其中终极腐霉(P. ultimum)引起马铃薯腐烂程度最严重;禾谷镰刀菌接种马铃薯薯块表现明显的致腐作用;立枯丝核菌(R. solani)及球炭疽菌(C. coccodes)能引起马铃薯轻微发病;但是木贼镰刀菌(F. equiseti)及产黄色镰刀菌(F. thapsinum)未观察到发病症状,
2.设计配制了多种组合致病疫霉培养基,其中筛选出能较好使致病疫霉生长的三种培养基,分别为Oat4、Oat8及Oat10。,培养基中添加CaCO3对于致病疫霉的生长起着促进作用,加入番茄汁的培养基会使菌丝生长更加致密。
3.采用对峙培养法和分子生物学手段鉴定了本试验中所分离的致病疫霉,发现得到的致病疫霉交配型均为A1交配型;并通过线粒体单倍型鉴定引物P2和P4扩增菌物DNA,确定所分离纯化的致病疫霉线粒体单倍型均为Ⅱb型;同时发现,采用马铃薯晚疫病病原分型的引物W16扩增病菌DNA对确定致病疫霉交配型的准确性更高,与分型引物LB相比,二者鉴定准确率分别达到100%和83.9%。
1.从腐烂马铃薯种薯中分离、纯化并鉴定,共得到了261株菌株,鉴定出致病疫霉(Phytophthora infestans)62株,占比23.75%,锐顶镰刀菌(Fusarium acuminatum)52株,占比19.93%,尖孢镰刀菌(F. oxysporum)43株,占比16.48%,立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)22株,占比8.43%,禾谷镰刀菌(F. graminearum)21株,占比8.04%,终极腐霉(Pythium ultimum)18株,占比6.90%,细极链格孢(Alternaria tenuissima)17株,占比6.51%,球炭疽菌(Colletotrichum coccodes)14株,占比5.36%,木贼镰刀菌(F. equiseti)7株,占比2.68%,产黄色镰刀菌(F. thapsinum)5株,占比1.92%,共计10种。通过对分离纯化的病原菌物的致病性测定,明确了由致病疫霉引起的马铃薯晚疫病和由部分镰刀菌引起的马铃薯干腐病为引起马铃薯腐烂的主要病害;同时发现致病疫霉(P. infestans)、锐顶镰刀菌(F. acuminatum)、尖孢镰刀菌(F. oxysporum)、禾谷镰刀菌(F. graminearum)、终极腐霉(P. ultimum)、细极链格孢(Alternaria tenuissima)这6种菌种可以引起马铃薯明显发病腐烂;其中终极腐霉(P. ultimum)引起马铃薯腐烂程度最严重;禾谷镰刀菌接种马铃薯薯块表现明显的致腐作用;立枯丝核菌(R. solani)及球炭疽菌(C. coccodes)能引起马铃薯轻微发病;但是木贼镰刀菌(F. equiseti)及产黄色镰刀菌(F. thapsinum)未观察到发病症状,
2.设计配制了多种组合致病疫霉培养基,其中筛选出能较好使致病疫霉生长的三种培养基,分别为Oat4、Oat8及Oat10。,培养基中添加CaCO3对于致病疫霉的生长起着促进作用,加入番茄汁的培养基会使菌丝生长更加致密。
3.采用对峙培养法和分子生物学手段鉴定了本试验中所分离的致病疫霉,发现得到的致病疫霉交配型均为A1交配型;并通过线粒体单倍型鉴定引物P2和P4扩增菌物DNA,确定所分离纯化的致病疫霉线粒体单倍型均为Ⅱb型;同时发现,采用马铃薯晚疫病病原分型的引物W16扩增病菌DNA对确定致病疫霉交配型的准确性更高,与分型引物LB相比,二者鉴定准确率分别达到100%和83.9%。