目的:非小细胞肺癌约占整体肺癌病例的85%,发病率高,致死率高,大量患者缺乏有效的药物治疗策略,对其致病机制的研究具有重要意义。连接组蛋白H1和核心组蛋白是染色质的重要组成部分,能够影响染色质结构,通过表观遗传调控机制,在DNA序列不变的情况下影响基因表达。常见H1变体H1.2可参与细胞周期和凋亡等活动,影响多种肿瘤的增殖和侵袭,然而,H1.2在肺癌中的作用尚无报道。此外,组蛋白去甲基化酶KDM6A能调控核心组蛋白H3的甲基化,在不同肿瘤中既可扮演肿瘤抑制因子,也可发挥癌基因的作用;它在肺癌中的功能尚无定论,且已知机制大多集中于KDM6A如何调控下游靶基因转录,对于其上游网络的探索有限。本文旨在研究H1.2和KDM6A这两种具有表观遗传调控功能的分子在非小细胞肺癌中的作用及具体分子机制。方法:通过蛋白免疫印迹等方式检测临床肺癌样本中的H1.2和KDM6A水平,并在多个肺癌细胞中敲除、敲低或过表达相应分子,考察增殖迁移等表型变化。H1.2相关研究中,使用肺癌原发转基因小鼠考察表型并进行转录组学测序分析,通过检测活性氧及谷胱甘肽水平考察了细胞抗氧化能力;KDM6A相关研究中,使用多种小分子抑制剂探索了表皮生长因子受体EGFR相关通路与KDM6A的联系。此外,通过在线数据库分析了H1.2和KDM6A与肺癌预后的联系。结果:第一部分结果中,H1.2在肺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织,高表达H1.2患者预后较差,敲除H1.2的肺癌细胞和小鼠中肿瘤增殖减慢。H1.2与介导抗氧化反应的重要核转录因子Nrf2结合,H1.2敲除导致Nrf2在核内水平下降,谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基GCLC（谷胱甘肽合成限速酶之一）转录下调,细胞合成谷胱甘肽能力受损,抗氧化能力降低。第二部分结果中,临床样本中KDM6A水平与EGFR磷酸化水平呈正相关性,细胞中EGFR激活其下游的转录调控因子STAT3磷酸化导致KDM6A的m RNA和蛋白水平上调;敲低KDM6A或抑制其酶活性均会抑制肺癌细胞增殖。结论:本论文的两部分研究均从临床样本的检测结果出发,一方面,基于H1.2在肿瘤中的高表达及其水平与预后的关系,发现H1.2通过调控抗氧化系统参与非小细胞肺癌恶性增殖;另一方面,基于KDM6A在肿瘤中与EGFR磷酸化水平的正相关性,发现了KDM6A受到由EGFR及STAT3激活介导的转录调控,且其促恶性增殖的作用依赖于酶活性,可能有潜力成为治疗特定类型肺癌的靶标。创新点:本论文的发现提示了H1.2与KDM6A的促肺癌作用,对非小细胞肺癌发生发展机制进行了补充,为进一步研究表观遗传机制的药物提供了新的理论基础,为探索表观遗传调控与肿瘤中其它通路的交叉作用提供了新视角。