牛血清白蛋白/黄酮纳米核壳颗粒的制备及抗氧化活性研究

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具有天然活性的黄酮化合物广泛存在于自然界中,对于人类的多种疾病有着显著的疗效。在使用天然黄酮类化合物时,人们一直在追求提高黄酮疗效的同时降低其副作用,即提高黄酮化合物的利用度。最理想的方法应该是能够将药物靶向输送到疾病影响的器官,组织或细胞部位。天然黄酮类活性成分结构方面的差异影响其在体内的运输和体内的吸收、代谢和生物活性。无论黄酮小分子直接或间接进入血液,都会与血浆蛋白结合,其结合程度与多酚的结构密切相关。随着纳米科技与生物医学研究的交叉融合,如何结合纳米技术来提升生物医学的研究方法和研究手段,实现研究水平新的突破,已成为纳米生物医学发展的重要目标。本文选取牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)作为载体蛋白,与32种不同结构的黄酮化合物制备成32种BSA/黄酮纳米颗粒,从理论和实验水平上系统研究了多酚的结构对BSA包覆黄酮的影响以及被包覆后多酚的活性变化,主要研究内容如下:一、采用TEM表征制备后的3种纳米颗粒形态结构和BSA本身结构,结果表明3种纳米颗粒的大小均在20 nm,BSA包覆黄酮前后,结构并为发生明显变化。二、利用HPLC测定分析32种黄酮的包覆率。结果表明黄酮被包覆率的大小差异明显。分析表明每种黄酮化合物与BSA结合能力大小都是不尽相同的,黄酮分子的结构对两者的结合有着重要的作用。结合小分子与蛋白质的相互作用关系的分析总结出,含有糖苷化羟基的黄酮类化合物,与BSA的相互作用较弱,包覆率相对较低;而羟基的甲基化和B环上的羟基数目多的黄酮类化合物与BSA的结合能力强,包覆率相对较高;黄烷酮类化合物的羟基的位置影响其与BSA的相互作用,使得包覆率也存在差异。三、选择抗氧化活性较强的12种黄酮类化合物,建立3种抗氧化实验体系全面评价被包覆后黄酮类化合物的抗氧化活性,结果表明,被包覆后形成的蛋白质核壳黄酮纳米颗粒的抗氧化活性比未被包覆的黄酮抗氧化活性减弱。通过IC50值反应出不同的黄酮在3种抗氧化实验中减弱的程度也不同,结合它们结构特点和3种抗氧化实验的特点,初步推测出12种黄酮与BSA形成部分氢键的位置。
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