【摘 要】
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众所周知,猪伪狂犬病毒病被定义为极难防疫的自然疫源性疾病,在全球范围内广泛传播,其中欧美一些国家已具备有效的疾病防控手段和扑杀程序,但在第三世界国家,仍无法对该病进行有效的防控。在我国,猪伪狂犬病疫情曾一度通过疫苗免疫的手段得到控制,但于2010年起,猪伪狂犬病病毒在我国发生了大范围的突变,从而导致2010年以前我国建立的防控措施效果大幅下降,致使该病在全国范围内再次呈爆发趋势。为了满足我国现阶段
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众所周知,猪伪狂犬病毒病被定义为极难防疫的自然疫源性疾病,在全球范围内广泛传播,其中欧美一些国家已具备有效的疾病防控手段和扑杀程序,但在第三世界国家,仍无法对该病进行有效的防控。在我国,猪伪狂犬病疫情曾一度通过疫苗免疫的手段得到控制,但于2010年起,猪伪狂犬病病毒在我国发生了大范围的突变,从而导致2010年以前我国建立的防控措施效果大幅下降,致使该病在全国范围内再次呈爆发趋势。为了满足我国现阶段猪伪狂犬病病毒(PRV)抗原高频突变引发新疫情诊断的需求,本实验通过生物信息学分析比较,设计合成了多个针对PRV gB、gC、gG 3种糖蛋白高度保守的抗原优势表位区肽段,分别命名为gB872、gC144和gG237。分别以此三条肽段为抗原包被物,经过条件优化建立了PRV-gB间接ELISA抗体检测方法。该ELISA方法检测结果显示,仅对PRV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒(O型)、猪细小病毒、猪圆环病毒2型等主要猪源病毒阳性血清均无特异性反应,表明具有良好的特异性;与OIE推荐使用的荷兰BioChek PRV-gBAntibody Test Kit对比分析显示,该检测方法的特异性达到100%,敏感性为97%;其综合性能优于国内同类产品,可用于对易感动物群PRV抗体水平的检测。该方法的批内、批间重复性强,变异系数均低于10%,血清稀释度可以达到1∶128;本方法具有操作简便,用时短,适用于大规模检测PR血清。本研究建立的间接ELISA检测方法经检测证明,可对2010年后变异毒株感染的血清样品进行有效准确的检测,同时也可检测出猪伪狂犬病病毒疫苗免疫效果。该研究对我国疫病的流行病学调查及防控具有重要意义。
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