季鏻化壳聚糖作为疫苗递送载体用于免疫接种的研究

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壳聚糖(CS)在疫苗递送载体具有良好的应用潜力,但是其不水溶性大大限制了其应用。鉴于目前尚未出现关于水溶性季鏻化壳聚糖(NPCS)应用于疫苗递送载体的报道,本课题计划合成一种NPCS,并研究其递送卵清蛋白(OVA)所引发的免疫效果。研究内容主要有三部分:1.NPCS的制备及其表征。本文通过均相反应,将小分子季鏻盐(CTPB)接枝到CS上制成NPCS,然后进行物化性质表征,并测试其抗菌活性和血液相容性。结果表明220 nm左右的NPCS带有正电荷,接触角为26.6°,具有良好的水溶性、抗菌性、生物相容性和血液相容性。2.NPCS/OVA疫苗制剂通过肌肉注射的免疫效果。NPCS和OVA制成疫苗制剂,通过肌肉注射免疫Balb/c小鼠。在1 mg/m L NPCS/OVA的疫苗制剂作用下,DC2.4细胞对OVA的摄取率为20%,在小鼠注射部位的OVA强度到第10天才衰减为0,免疫小鼠产生的抗原特异性Ig G效价约为25000,脾细胞增殖指数约为1.5。总之,基于NPCS的疫苗制剂能显著增强抗原呈递、脾细胞增殖、IgG水平和细胞因子分泌。3.NPCS/OVA疫苗制剂通过鼻黏膜免疫的效果。NPCS与OVA通过不同的质量比制成疫苗制剂,通过鼻黏膜免疫Balb/c小鼠。结果表明,质量比为1:1和10:1的NPCS/OVA制剂能够诱导显著增强的脾细胞增殖、IgG及IgA抗体滴度、细胞因子分泌、IFN-γ和IL-4分泌型脾细胞、效应记忆CD4+T细胞。总之,NPCS是一种带正电的、血液相容性良好的水溶性壳聚糖衍生物,不仅具有良好的抗菌性,而且有潜力应用于疫苗递送载体。
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