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研究背景: 小儿遗尿症指5岁或5岁以上小儿夜间不能从睡眠中醒来而发生的无意识排尿,是目前严重威胁儿童身心健康的疾病之一。目前本病的发病机制尚不明确,但国内外的研究方向主要集中于逼尿肌不稳定,现在大多认为逼尿肌不稳定与膀胱Cajal间质细胞有着密切的关系。在对膀胱兴奋性表达的研究方面,HCN通道作为膀胱 ICCs细胞中产生过度激活正离子流电流的结构基础,HCN通道蛋白表达的增加或减少都会直接引起起搏细胞的兴奋性改变,对于膀胱细胞兴奋性的维持和调节可能具有关键性的作用。我们在前期的临床观察中发现宣肺法治疗小儿遗尿症疗效肯定,为了研究宣肺法治疗小儿遗尿的科学内涵,故本研究以越婢汤为干预方剂,以膀胱ICC样细胞作为靶点,探讨宣肺法对遗尿症不稳定膀胱模型的可能作用机制 研究目的: 本研究旨在从细胞、分子水平阐明逼尿肌不稳定的可能作用机制,并对中医宣肺法治疗遗尿作出现代实验科学的论证。 研究方法: 将 wistar大鼠分为膀胱出口梗阻手术组和假手术组,6周后行尿动力检查筛选出手术组膀胱逼尿肌不稳定大鼠和假手术组膀胱逼尿肌稳定大鼠进行研究。将手术组分为越婢汤组、缩泉丸对照组、模型对照组,加上假手术组共4组,每组10-13只大鼠。给药2周后观察各组变化。用免疫荧光染色法、平均光密度测定检测膀胱ICCS细胞含量及HCN蛋白含量,并做出数据处理分析,从膀胱兴奋性表达的角度探讨越婢汤对膀胱逼尿肌不稳定的可能作用机制。 研究结果: 1.造模结果:手术6周后,经尿动力学检测仪进行充盈性膀胱测压检测,假手术组 DI发生率为16.7%(2/12);手术组70只,死亡13只,DI发生率为71.9%(41/57)。 2.宏观疗效:与模型组相比,假手术组大鼠膀胱湿重明显降低,具有非常显著的统计学意义(P<0.01),与模型对照组相比,越婢汤组大鼠膀胱湿重明显减轻,具有统计学意义(P<0.05)。 3.药物对膀胱ICCs细胞及HCN蛋白表达的影响:与模型对照组相比,假手术组大鼠膀胱c-kit蛋白及HCN2蛋白含量明显降低,具有统计学意义(P<0.01);与模型对照组相比,越婢汤干预后大鼠膀胱c-kit及HCN2蛋白含量减少,具有显著的统计学意义(P<0.01)。 研究结论: 1.逼尿肌不稳定膀胱中ICCs细胞数量及HCN蛋白含量增多。 2越婢汤可以明显下调逼尿肌不稳定膀胱中ICCs细胞数量及HCN蛋白含量。 3.越婢汤可以通过影响膀胱兴奋性来改善逼尿肌不稳定。