长白山野生食用菌多糖抗突变作用的研究

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目的我国有着丰富的野生食用菌资源,东北地区尤为丰富,其中以长白山地区为主,它位于吉林省东南部,呈东北-西南走向,地域较为广阔,地形非常复杂,森林覆盖率高,素有“长白林海”之美誉。优越的地理位置使得其具有降水量充沛、适宜的气候,成为了野生食用菌的天然生长基地。长白山地区可供食用和药用的菌类达到200种以上。但是由于食用菌保存与加工技术还不够成熟所以对食用菌的开发利用率还比较低,开发还处于初级阶段,加工产品科技含量低,附加值不高。本实验利用了产自长白山地区的五种主要野生食用菌桑黄、灵芝、桦褐孔菌、猴头菇和榛蘑。从食用菌中提取出食用菌粗多糖进行抗氧化实验和抗突变实验,为食用菌保健品的开发以及精细加工提供理论依据。方法1.五种野生食用菌以水提醇沉法提取食用菌多糖,用苯酚硫酸法测定食用菌多糖的含量。用刚果红显色法测定食用菌多糖中主要的活性多糖葡聚糖的含量。2.为研究长白山地区野生食用菌多糖的抗氧化活性,本试验利用不同浓度的五种野生食用菌多糖,测定了食用菌多糖对DPPH自由基的清除能力,以及羟自由基的清除能力。3.采用急性毒性经口试验,进行毒性分级。采用改良的Ames试验方法以及小鼠骨髓细胞微核试验观察食用菌多糖的致突变性和抗突变性。对食用菌多糖的致突变作用和抗突变作用进行试验研究,为进一步深入开发利用长白山地区的野生食用菌资源提供依据。结果1.桑黄、灵芝和桦褐孔菌的粗多糖中多糖含量较高,超过60%;桦褐孔菌的p-葡聚糖含量较高,超过30%。其中猴头菇粗多糖中β-葡聚糖含量占猴头菇粗多糖的69%,而桑黄和灵芝中β-葡聚糖占粗多糖比重较小2.五种野生食用菌多糖均有一定的DPPH自由基清除作用,但是清除能力的大小有一定差异,桑黄多糖对DPPH自由基的清除效果要好于其他多糖。桑黄多糖在125μg/mL的浓度下清除率达到83.8%。五种食用菌多糖对羟自由基的清除率,随着浓度的增加而缓慢升高,但是趋势不明显。而野生食用菌多糖的浓度为500μg/mL时的羟自由基的清除率在30.1%-42.9%之间,显示出一定的清除羟自由基能力。3.抗突变试验中五种食用菌多糖在MNNG(0.4μg/plate)诱导的TA100试验中,在最高浓度200μg/plate的条件下抗突变作用都达到了70%以上。在4NQO诱导的TA98实验中最高浓度200μg/plate桦褐孔菌多糖显示出80%以上的抑制率,而在TA100实验中桑黄多糖和桦褐孔菌多糖抑制率达到了90%。五种食用菌多糖的摄入对微核的形成没有影响,说明五种食用菌多糖没有致突变性。其中桦褐孔菌多糖与灵芝多糖在500mg/kg·BW剂量下,对小鼠骨髓微核的抑制效果最好,抑制率达到77.0%和70.1%。结论1.五种食用菌多糖均具有一定的抗氧化能力,其中桑黄多糖的抗氧化能力高于其他食用菌多糖。2.五种食用菌多糖均具有一定的抗突变性,其中桑黄多糖与桦褐孔菌多糖的抗突变效果最强。3.五种食用菌多糖对小鼠微核的形成有抑制作用,其中桦褐孔菌多糖显示了最强的抑制效果。
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