【摘 要】
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乳酸杆菌作为益生菌,给人们带来了很大的福利,它对肠道黏膜表面的黏附被公认为是使乳酸杆菌定植在肠道和发挥益生菌功能最重要的前提之一,其中S层蛋白（S-layer Protein, SLP）是使乳酸杆菌具有黏附功能的主要物质之一。SLP是位于细胞壁或细胞膜表面的一层由蛋白或糖蛋白亚单位组成的晶格状结构。乳酸杆菌SLP是已知SLP中分子量最小的一类,分子量在25-71KDa之间,均为碱性蛋白。本试验对已
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乳酸杆菌作为益生菌,给人们带来了很大的福利,它对肠道黏膜表面的黏附被公认为是使乳酸杆菌定植在肠道和发挥益生菌功能最重要的前提之一,其中S层蛋白（S-layer Protein, SLP）是使乳酸杆菌具有黏附功能的主要物质之一。SLP是位于细胞壁或细胞膜表面的一层由蛋白或糖蛋白亚单位组成的晶格状结构。乳酸杆菌SLP是已知SLP中分子量最小的一类,分子量在25-71KDa之间,均为碱性蛋白。本试验对已被报道的乳酸杆菌的SLP基因序列进行比对分析,从中找出了一段具有特异性的基因序列,通过探针设计,以地高辛标记,制备了特异性的寡核苷酸探针,5’-AGACTATTAT GGACAACGCT TACTTCTACG-3’。为了鉴定探针的特异性,以实验室现有的含SLP基因的短乳杆菌（L. brevis） C、短乳杆菌（L. brevis） M和瑞士乳杆菌（L. helveticus） ATCC15009 3株乳酸杆菌为标本进行菌落原位杂交。试验结果表明,设计的寡核苷酸探针具有一定的特异性,能很好的检测乳酸杆菌中SLP基因。利用SL培养基从自制的泡菜水、自制的酸肉、光明奶酪以及动物肠道等不同生境中,分离得到45株菌,通过镜检和过氧化氢酶测定初步确认为乳酸杆菌。将45株菌通过裂解的方法使DNA暴露于硝酸纤维素滤膜上,通过烘烤的方法固定DNA,使用制备的探针与之杂交,显色观察结果。试验证明在这45株菌中有8株含SLP基因,将这8株菌进行SDS-PAGE蛋白电泳,结果显示,这8株菌都具有不同分子量的SLP,对有些较单一的条带,可考虑将其纯化,进行下一步的研究。从这8株菌中选取了具有不同分子量SLP的3个菌株进行16S rRNA鉴定,通过同源性比对可知,这3株菌其中有2株为罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）,另外一株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。关于罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）产生SLP还鲜见相关报道。
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