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目的:肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）占原发性肝癌总病例的75%,而由于发病率增高（18.3/10万人）以及庞大的人口基数我国肝癌病例累计数量居世界第一[1]。在我国肝细胞癌的发生主要与慢性HBV感染、黄曲霉素暴露相关[2]。目前,肝癌的治疗方法主要包括肝切除术、肝移植术、局部射频消融治疗、经动脉化疗栓塞术、放疗、系统治疗（包括分子靶向药物和系统化疗、免疫治疗）、中医治疗等方法[3]。手术切除、局部消融治疗或肝移植可有效治疗早期患者（巴塞罗那分期0期和A期）。在经验丰富的医疗中心,肝功能Child’s A且无明显门静脉高压症的患者术后5年生存期大约为59%-68%[4]。但是由于肝细胞癌增殖、侵袭、微血管浸润以及炎症环境的影响,手术切除、局部消融治疗或肝移植后仍有复发的可能[5]。有研究表明在手术切除、局部消融治疗后,仍有超过60%的患者在5年内复发肝细胞癌[6,7]。而同种异体肝脏严重短缺又极大地限制了肝细胞癌肝移植[8]。因此对于肝细胞癌复发以及肝细胞癌无法被切除的患者,系统治疗作为延缓肿瘤的发展、延长病人的生存期、提高病人生存质量的方法具有重要意义。FOLFOX4（氟尿嘧啶,亚叶酸,奥沙利铂）方案作为唯一一线系统化疗方案被原发性肝癌诊疗规范（2022版）推荐。在一项随机多中心临床实验中FOLFOX4方案相比多柔比星提高了肝癌患者的无进展生存期、总生存率[9]。但仍有研究发现耐药的发生减弱了铂类药物治疗肝癌的效果[10,11]。因此提高HCC对于化疗药物的敏感性对肝癌晚期患者的意义非凡。在本研究中我们通过对GEO数据库中顺铂处理以及未处理的HCC细胞的芯片数据筛选分析,获得差异表达的mi RNA,并通过脂质体转染构建了mi R-27a-3p过表达以及低表达的肝细胞癌细胞模型。MTT实验确定mi R-27a-3p可以增强外肝细胞癌细胞对顺铂的敏感性,随后通过裸鼠皮下成瘤以及尾静脉给药证明mi R-27a-3p可以增强肝细胞癌细胞对顺铂的敏感性。流式细胞术以及蛋白免疫印迹法确定mi R-27a-3p通过增强肝细胞癌细胞的凋亡增强肝细胞癌细胞对于顺铂的敏感性。随后通过二代测序技术,我们推测肝细胞癌细胞中存在mi R-27a-3p/JUN的调控通路,并且通过q PCR以及蛋白免疫印迹进行细胞学验证,证明了mi R-27a-3p可以抑制JUN的表达。最后我们通过小干扰RNA抑制JUN的表达,并通过MTT、蛋白免疫印迹实验证明mi R-27a-3p通过JUN通路增强肝细胞癌细胞对于顺铂的敏感性,进而为通过靶向关键micro RNA增强肝细胞癌系统治疗效果提供新的靶点。方法:（1）通过GEO数据库进行筛选差异表达的micro RNA。（2）通过转染构建mi R-27a-3p过表达以及低表达的肝细胞癌细胞,随后通过MTT实验判断差异表达的micro RNA对肝细胞癌细胞对于顺铂的敏感性的影响。并通过流式细胞术以及蛋白免疫印迹判断肝细胞癌细胞在顺铂诱导下的死亡机制。（3）结合TCGA数据库以及二代测序技术,通过KEGG富集分析以及GO富集分析,推测mi R-27a-3p下游可能的靶点。（4）通过实时定量PCR以及蛋白免疫印迹验证mi R-27a-3p对下游靶基因JUN表达水平的影响。（5）通过小干扰RNA技术抑制下游靶点JUN基因的表达并使用RT-q PCR以及蛋白免疫印迹验证敲除效果。通过MTT探究其在调控顺铂诱导下肝癌细胞凋亡中的功能。（6）通过皮下成瘤后在瘤中下注射mi R-27a-3p agomir构建mi R-27a-3p高表达的动物模型,经尾静脉注射顺铂每3天一次总计3次,并统计裸鼠体重与肿瘤体积。结果:（1）通过Limma函数包对GSE55806数据集进行差异表达分析,筛选差异表达的micro RNAs。其中mi R-27a-3p差异表达具有显著差异且差异表达的倍数位居前列,提示mi R-27a-3p可能与肝细胞癌细胞顺铂敏感密切相关。（2）通过脂质体转染技术构建了mi R-27a-3p过表达以及低表达的肝细胞癌细胞模型,随后通过MTT实验发现mi R-27a-3p增强肝细胞癌细胞对于顺铂的敏感性。并通过流式细胞术发现mi R-27a-3p通过促进肝细胞癌细胞的凋亡增强肝细胞癌细胞对顺铂的敏感性。进一步的蛋白免疫印迹结果表明mi R-27a-3p促进了凋亡蛋白caspase 3的表达。（3）结合TCGA数据库以及二代测序技术,通过KEGG富集分析以及GO富集分析,推测mi R-27a-3p下游可能的靶点为JUN。（4）通过实时定量PCR以及蛋白免疫印迹验证mi R-27a-3p抑制JUN的表达。（5）通过小干扰RNA技术抑制下游靶点JU N基因的表达并使用RT-q PCR以及蛋白免疫印迹验证敲除效果。通过MTT表明JUN的抑制可以增强肝细胞癌细胞对于顺铂的敏感性。（6）裸鼠皮下成瘤后通过裸鼠向皮下注射mi R-27a-3p agomir构建mi R-27a-3p高表达的动物模型,皮下成瘤后经尾静脉给顺铂并统计肿瘤体积以及裸鼠体重,发现mi R-27a-3p可以在体内增强肝细胞癌细胞对于顺铂的敏感性。结论:（1）本研究通过对GEO数据库中顺铂抗肝癌作用相关的micro RNA进行的差异表达分析,发现micro RNA-27a-3p可能与肝癌细胞的顺铂敏感性相关,进一步通过体内外实验发现micro RNA-27a-3p增强肝癌对于顺铂的敏感性,并且体外实验发现micro RNA-27a-3p通过增强Huh7细胞系中凋亡蛋白的高表达促进肝癌对于顺铂敏感。（2）本研究通过对TCGA数据库中对micro RNA-27a-3p高表达与低表达的HCC组织的综合生物学分析,以及结合对micro RNA-27a-3p高表达与低表达的Huh7细胞的转录组测序的综合生物学分析,推测mi R-27a-3p可能通过调节Jun信号通路调节肝细胞癌顺铂敏感性。体外实验发现micro RNA-27a-3p通过抑制Huh7细胞系中Jun信号通路的激活增强肝癌对于顺铂的敏感性。