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目的:研究黄芪注射液对阿霉素诱导小鼠心肌细胞凋亡影响,探讨其可能的作用机制,指导临床合理用药,为中西药联合防治肿瘤提供实验依据。 方法:本课题采用随机平行同期对照的方法,建立阿霉素心肌病动物模型(ADR)。选取昆明小鼠,体重20±2g,清洁级。实验动物按随机数字表随机分为正常对照组、阿霉素模型组和黄芪注射液治疗组(大、中、小3个剂量组)。正常对照组,每日腹腔注射(ip)生理盐水10ml/kg;阿霉素模型组,隔日腹腔注射阿霉素3mg/kg;阿霉素+黄芪注射液大剂量组(12g生药/kg),阿霉素+黄芪注射液中剂量组(6g生药/kg),阿霉素+黄芪注射液小剂量组(3g生药/kg),黄芪注射液每日腹腔注射1次,阿霉素3mg/kg隔日腹腔注射1次。黄芪注射液连续给药14日。末次给药后24h,采血,解剖取出心脏,制备标本。通过流式细胞仪分析技术(FCM)、生物化学、及病理形态学等测量方法,对照观察黄芪注射液对各组小鼠一般状态,病理改变、心肌细胞凋亡,心肌细胞线粒体膜电位、心肌组织和血液中NO、GSH、SOD等的影响。 结果:1.心肌细胞凋亡:黄芪注射液可降低ADR小鼠心肌细胞凋亡百分率,抑制心肌细胞凋亡。结果显示心肌细胞凋亡百分率为:正常对照组(3.75±1.75);阿霉素模型组(34.5±15.92);阿霉素+黄芪注射液大剂量组(27.05±7.22);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(10.037±4.92);阿霉素+黄芪注射液小剂量组(9.95±7.18)。各组分别与阿霉素模型组比较,阿霉素+黄芪注射液小剂量组(3g生药/kg)和阿霉素+黄芪注射液中剂量组(6g生药/kg)均有显著性差异(P<0.01)。 2.线粒体膜电位:黄芪注射液能稳定ADR小鼠心肌细胞膜电位,减缓心肌细胞凋亡。结果显示线粒体膜电位为:正常对照组(1.86±0.22);阿霉素模型组(0.88±0.27);阿霉素+黄芪注射液大剂量组(1.07±0.14);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(1.33±0.18);阿霉素+黄芪注射液小剂量组(1.43±0.16)。各组分别与阿霉素模型组与比较有差异(P<0.05)。 3.还原型谷胱甘肽含量:在心肌匀浆液中,正常对照组(3.99±0.47);阿霉素模型组(2.02±0.22);阿霉素+黄芪注射液大剂量组(2.77±0.16);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(2.88±0.56);阿霉素+黄芪注射液小剂量组(2.67±0.28)。各组分别与阿霉素模型组比较均有显著性差异(P<0.01);阿霉素+黄芪注射液(大、中、小)剂量组间比较,还原型谷胱甘肽含量虽然有提高趋势,但无统计学意义。在血浆中,正常对照组(1.68±0.21);阿霉素模型组(0.83±0.16);阿霉素+黄芪注射液大剂量组(1.09±0.09);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(1.10±0.12);阿霉素+黄芪注射液小剂量组(1.29±0.13)。各组分别与阿霉素模型组比较均有显著性差异(P<0.01);阿霉素+黄芪注射液(大、小)两剂量组相互比较,还原型谷胱甘肽含量也有显著性差异(P<0.05)。表明黄芪注射液可提高ADR小鼠细胞浆内还原型谷胱甘肽含量,保护心肌细胞,抑制细胞凋亡。 4.一氧化氮(NO)的含量:在心肌组织中,NO含量为:正常对照组(1.96±0.44);阿霉素模型组(1.43±0.48);阿霉素+黄芪注射液大剂量组(2.31±0.47);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(1.95±0.33);阿霉素+黄芪注射液小剂量组(2.48±0.48)。各组分别与阿霉素模型组比较,均有显著性差异(P<0.01)。在血浆中,NO含量为:正常对照组(1.71±0.46);阿霉素模型组(1.38±0.52);阿霉素+黄芪注射液大剂量组(2.10±0.48);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(1.54±0.48);阿霉素+黄芪注射液小剂量组(2.25±0.46)。各组分别与阿霉素模型组比较均有显著性差异(P<0.01)。表明黄芪注射液可提高ADR小鼠心肌组织和血浆中一氧化氮(NO)含量。 5.对超氧化物歧化酶(SOD)的影响:在心肌组织中,正常对照组(73.87±14.88);阿霉素模型组(68.78±23.10);阿霉素+黄芪注射液大剂量组(84.66±14.99);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(69.39±15.50),阿霉素+黄芪注射液小剂量组(68.78±18.35),各组分别与模型组比较,超氧化物歧化酶(SOD)的含量均比模型组高,但统计学分析均无显著性差异(P>0.05)。在血浆中,正常对照组(71.36±3.17);阿霉素模型组(53.48±10.95);阿霉素+黄芪注射液大剂量(63.91±6.79);阿霉素+黄芪注射液中剂量组(65.39±6.50);阿霉素+黄芪注射液小剂量组(67.99±6.37),各组分别与模型组比较,均有显著性差异(P<0.01),提示黄芪注射液可提高阿霉素所致的血浆中超氧化物歧化酶(SOD)水平 结论:通过流式细胞仪分析技术(FCM)、生物化学以及病理形态学等方法,研究黄芪注射液对阿霉素诱导小鼠心肌细胞凋亡的影响。结果显示黄芪注射液可降低ADR小鼠的心肌细胞凋亡百分率,抑制心肌细胞凋亡;稳定心肌细胞膜电位,减缓心肌细胞凋亡;增加ADR小鼠NO、GSH、SOD含量,保护心肌细胞。表明黄芪注射液通过多个环节调节作用,减少ADR小鼠心肌细胞凋亡,减轻心肌损伤,保护心肌细胞,改善心肌功能。