人胚胎干细胞（human embryonic stem cells,h ESCs）具有与体细胞不同的代谢表型。葡萄糖和氨基酸代谢在h ESCs多能性中的作用已经被广泛研究,而脂肪酸（fatty acid,FA）作为一种直接或间接参与能量代谢的重要物质,在代谢中的研究甚少。因此我们选用几种和FA代谢相关的物质,对h ESCs进行长时间的干扰刺激,通过细胞的生长状态、多能性基因的表达、FA的含量变化和相关基因表达等方面进行分析,从而确定外源添加物对h ESCs脂肪酸代谢的影响。本研究选用L-谷氨酰胺、D-葡萄糖和维生素B6等外源刺激物,将这些化合物分别配成1 mg/m L的浓储液,然后按照0.1%、0.5%、1%、5%、10%和30%的体积比稀释制备培养液对h ESCs进行培养,在不影响h ESCs生长的情况下,确定5%氯化钠、5%L-抗坏血酸、5%L-谷氨酰胺、10%氯化钙、10%D-葡萄糖、0.5%乙醇和1%与5%维生素B6作为细胞培养的最大浓度,收集培养15代的细胞进行多能性基因检测。实验结果显示,多能性基因OCT4在所有处理组均上调,NANOG除在乙醇、氯化钠和1%维生素B6组上调外,在其他条件下无明显变化。REX1均下调,KLF4除在氯化钠组外其余条件均下调,SOX2无明显变化。DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L也都随之发生变化。同时,应用气相色谱质谱联用仪采用外标法检测37种脂肪酸,并用RT-PCR检测相关基因的表达。结果显示,除氯化钠处理组外,其他组的总脂肪酸、饱和脂肪酸和长链脂肪酸的变化趋势基本保持不变,但所有处理组的多不饱和脂肪酸都普遍低于对照组;与此同时,乙醇处理后的h ESCs饱和脂肪酸增加,其它脂肪酸种类都降低;氯化钠处理组的总脂肪酸含量显著提高,葡萄糖处理组显著降低,而谷氨酰胺对总脂肪酸没有显著影响,但是谷氨酰胺处理组显著提高了单不饱和脂肪酸的含量,从而也证实葡萄糖抑制了h ESCs游离脂肪酸的合成。FA代谢相关的酶基因也同时发生改变,在乙醇和氯化钠处理组下,FA合成的相关基因ACLY、ACC1和FASN均上调,葡萄糖处理组显著下调,而谷氨酰胺处理组无明显变化。甘油三酯合成酶基因DGAT1和降解基因HSL只有乙醇组显著上调;FA氧化相关酶基因HADH和ACSS1均上调;FA合成转录因子基因C/EBPα、ADD1和PPARγ只有乙醇处理组上调。这些结果与FA含量的结果完全符合,再次证明葡萄糖抑制FA合成,氯化钠促进总脂肪酸的合成,谷氨酰胺对FA总体影响不大。综上所述,在外源化学物质刺激下,h ESCs的多能性与FA含量及其代谢相关的基因密不可分,具体机制还有待于深入的研究。