【摘 要】
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目的:辣木（Moringa oleifera L.）,原产于印度,阿拉伯半岛,为辣木科（Moringaceae）辣木属（Moringa Adans.）的多用途热带植物。辣木含多糖、苷、黄酮、酚、甾体、萜类以及生物碱等化学成分。近年来,因其含有结构较为特殊的腈基、异硫氰酸酯基和硫代氨基甲酸酯基,辣木所含化学成分的生物活性,被广泛研究,其降血糖、抗肿瘤、抗氧化和抗炎等生物活性被相继报道。银屑病是常见的
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目的:辣木（Moringa oleifera L.）,原产于印度,阿拉伯半岛,为辣木科（Moringaceae）辣木属（Moringa Adans.）的多用途热带植物。辣木含多糖、苷、黄酮、酚、甾体、萜类以及生物碱等化学成分。近年来,因其含有结构较为特殊的腈基、异硫氰酸酯基和硫代氨基甲酸酯基,辣木所含化学成分的生物活性,被广泛研究,其降血糖、抗肿瘤、抗氧化和抗炎等生物活性被相继报道。银屑病是常见的皮肤炎症疾病之一,在西方国家,罹患人群超过2%。近年来的多项研究表明,IL-23/IL-17轴在银屑病的发病机制中起着核心的作用;其中尤为关键的是IL-23,故而使用IL-23抑制剂来治疗银屑病是研究的焦点。本课题对辣木籽的化学成分进行分离和结构鉴定,并在佛波酯（TPA）诱导的小鼠类银屑病样动物模型上,研究辣木籽中化学成分对TPA诱导的动物皮损的影响和作用机制。方法:（1）采用硅胶柱色谱、羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱（Sephadex LH-20）、高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）等方法分离纯化化合物,通过核磁共振和质谱技术、以及文献比对结构进行鉴定。（2）对分离得到的化学成分进行细胞水平的抗炎活性筛选。以LPS诱导的巨噬细胞THP-1为炎症模型,采用CCK-8法测定化合物C3,C4,和C5对模型细胞的活性、荧光定量逆转录聚合酶链式反应（Real time-PCR）法测定炎症因子IL-1β、IL-12、IL-8、IL-23、IL-22和TNF-α的m RNA表达水平;（3）动物水平上的体内抗炎活性研究。建立以佛波酯（TPA）诱导的小鼠类银屑病样动物模型,以化合物C3、C4和C5制成的乳剂进行干预治疗,观察给药前后小鼠皮损程度形态学变化,包括给药后小鼠皮肤厚度、真皮层毛细血管扩张、和炎症细胞浸润的变化;通过实时荧光定量核酸扩增检测系统（Real-time Quantitative PCR Detecting System,QPCR）检测小鼠皮损区域IL-17和IL-23 RNA表达情况。结果:（1）从辣木籽中分离出5种单体化合物,分别为豆甾醇stigmasterol（C1）、长链烃（C2）、谷甾醇-3-o-β-D吡喃葡萄糖苷sitosterol-3-o-β-D-glucopyranoside（C3）、niazirin（C4）、marumoside A（C5）。（2）体外抗炎活性研究结果显示,化合物sitosterol-3-o-β-D-glucopyranoside（C3）、niazirin（C4）和marumoside A（C5）均可对细胞因子IL-1β、IL-8、IL-12、IL-17、IL-22、IL-23和TNF-α的m RNA相对含量有一定调节能力,其中,对IL-17的调节作用最为显著（P<0.05）,IL-22和L-23次之（P<0.05）。之后检测三种化合物对THP-1培养液中IL-23蛋白表达的影响,结果显示化合物C3和C4均可大幅降低培养液中IL-23的水平,而化合物C5可刺激IL-23产生及释放增高（P<0.05）;（3）动物实验结果显示研究辣木籽中的体外抗炎活性物质改善了佛波酯（TPA）诱导的小鼠银屑病皮损;皮肤组织切片也证明了化合物C3、C4和C5均能有效抑制TPA诱导的棘层增厚和皮肤炎症、充血改变;RT-PCR结果显示,C3和C5治疗组中,IL-17和IL-23 m RNA的表达量均有明显下降,与模型组差异具有统计学意义（P<0.05）;而C4治疗组的IL-23表达量均有所升高,且呈浓度依赖性。结论:从辣木籽中分离得到的三种化合物sitosterol-3-o-β-D-glucopyranoside（C3）、niazirin（C4）、marumoside A（C5）在LPS诱导下巨噬细胞THP-1炎症模型上均表现出抗炎活性,并改善了佛波酯（TPA）诱导的小鼠银屑病模型动物的皮损。
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