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灵芝(Ganoderma lucidum)是中国传统名贵中药。现代药理学研究表明,灵芝具有免疫调节、抗肿瘤、抗血栓、抗氧化、抗病毒、抗辐射、护肝、降血压等药理作用。近年来,灵芝液体培养以其生产周期短、培养物营养丰富以及便于收集加工等优点越来越受到重视,在高产菌株的选育、发酵培养基、发酵条件和发酵过程的优化等方面作了大量研究。已有研究表明,在灵芝培养基中添加合适的促进剂可促进灵芝活性成分(灵芝酸、灵芝多糖等)的生物合成,其中薏苡仁是良好的促进剂之一,本实验以薏苡仁油和薏苡仁酯为促进剂,研究其对灵芝液体深层发酵的影响,以揭示薏苡仁促进灵芝深层发酵的机理,试验结果如下:1、考察薏苡仁油不同添加量(0.5%、1%、2%、4%)和不同添加时间(0h、24h、48h、96h)对灵芝深层发酵的影响显示,薏苡仁油能够促进灵芝菌体生长、灵芝多糖及灵芝酸的生产,但不同添加量和添加时间,对灵芝深层发酵的促进作用也不同,其中在发酵0h添加2%薏苡仁油对灵芝生物量、灵芝多糖和灵芝酸的综合促进效果最佳。对多糖及灵芝酸进行组分对比分析发现,添加薏苡仁油不会影响灵芝菌胞内多糖、胞外多糖和灵芝酸的组分,但是会影响胞外多糖各组分的含量。对灵芝菌体多糖合成关键酶的研究表明,薏苡仁油能够抑制磷酸葡萄糖异构酶的活性,促进α-磷酸葡萄糖变位酶的活性,从而推动糖酵解途径向多糖合成的方向进行。2、考察薏苡仁酯不同添加量(0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1%)和不同添加时间(0h、24h、48h、96h)对灵芝深层发酵的影响显示,薏苡仁酯能够促进灵芝菌体生长、灵芝多糖及灵芝酸的生产,但不同的添加时间和添加量,对灵芝菌生长、灵芝多糖和灵芝酸生产的促进作用也不同,其中在发酵24h添加0.2%薏苡仁酯对灵芝生物量、灵芝多糖和灵芝酸的综合促进效果最佳。对所得多糖及灵芝酸组分对比分析显示,薏苡仁酯对灵芝胞内多糖及灵芝酸组分无影响,但是对灵芝菌胞外多糖的组分的影响明显。对灵芝菌体多糖合成关键酶的研究表明,补加薏苡仁酯能够抑制磷酸葡萄糖异构酶活性,先抑制后促进α-磷酸葡萄糖变位酶活性,促使灵芝菌体代谢途径向多糖合成方向进行。补加薏苡仁酯能够同时抑制UDP-葡萄糖焦磷酸化酶和dTDP-葡萄糖焦磷酸化酶活性,多糖的生产略滞后于这两种酶的活性。