百合查尔酮合成酶(CHS)基因对花色调控影响的研究

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本研究从东方百合‘索邦’花瓣中分离了对花色调控起重要作用,花色素苷生化合成途径的早期关键基因-查尔酮合成酶(CHS)基因,进行生物信息学分析及功能验证,旨在为培育蓝色百合花提供理论依据和技术支持。取得的研究结果如下:1、克隆了东方百合‘索邦’CHS基因结合简并引物设计,使用RT-PCR ( Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction)技术从东方百合‘索邦’花瓣获得查尔酮合成酶(CHS)基因cDNA序列,并提交Genbank,登录号为:GQ483376,暂命名为LCHS2。2、构建了的过量表达载体和RNA干扰载体构建了花特异启动子PCHS和组成型启动子CaMV35S(Cauliflower mosaic virus35S)驱动的东方百合‘索邦’LCHS2基因过量表达载体和RNA干扰载体。3、东方百合‘索邦’LCHS2基因的瞬时转化分析用真空渗透的方法瞬时转化矮牵牛离体叶片,检测了东方百合‘索邦’LCHS2基因mRNA水平的转录情况和GFP(Green fluorescence protein)基因、GUS(β-glucuronidase)基因的蛋白表达情况,为遗传转化提供前期的检测手段。4、使用VIGS体系转化矮牵牛使用基于VIGS体系的RNA干扰技术转化矮牵牛,与野生型相比,花朵的颜色发生了变化,花色表型出现了镶嵌型、马赛克型和中间型3种类别,并且花色素苷的含量也有所降低。
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