Spirolaxines产生菌Phanerochaete chrysosporium SIIA-F1802的选育和发酵条件的优化

来源 :成都大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:penguin669
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
研究发现,真菌Phanerochaete chrysosporium的发酵产物Spirolaxine具有良好的抗幽门螺旋杆菌活性且有降血脂的药理作用。本课题通过对Spirolaxine产生菌SIIA-F1802进行菌种选育和发酵条件的优化研究,以提高Spirolaxine的发酵单位,本文主要研究内容有:1.基于ITS测序和系统发育树分析,最终确定菌株SIIA-F1802为黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium)。2.通过LC-MS对菌丝体内代谢产物进行了研究,初步确定与目标产物一致的色谱峰;根据粗提样品在不同展开剂中的展开情况,确定TLC的展开剂为甲醇:二氯甲烷=1:20,甲醇萃取发酵液后经过C18柱层析和结晶等方法分离纯化得到晶体样品0.7235 g,纯度达95.0%以上;通过紫外光谱、红外光谱、高分辨质谱、比旋光度和核磁共振波谱分析,确证目标物质与Spirolaxine同质,分子式为C23H32O6。3.经自然分离筛选出产量较高的菌株F1802-07(产量712.648 mg/L)作为后续诱变的出发菌株,根据各正突变率对比,确定紫外诱变照射时间应为120 s,NTG诱变浓度应为100.0μg/m L;紫外诱变筛选得到的高产突变菌株F1802-07-48,产量为1060.558 mg/L;以F1802-07-48作为出发菌株进行NTG诱变,得到菌株F1802-07-48-15,产量为1536.357 mg/L,遗传性能稳定。4.通过单因素筛选与响应面优化结合的方法,确定培养基的最佳配方为麦芽糖135.0 g/L,酵母浸粉9.0 g/L,精氨酸4.5 g/L,棉籽饼粉30.0 g/L、葡萄糖20.0g/L和磷酸二氢钾1.0 g/L;优化得到最佳培养条件:培养温度28±0.3℃、种子培养2 d、发酵周期为9 d、初始p H为5.5、摇瓶装液量为25 m L、接种量为10%和摇床转速为250 r/min,Spirolaxine的产量达到3597.438 mg/L,与初始产量相比提高了134.2%。本研究对真菌SIIA-F1802进行了菌种鉴定,确定该菌为黄孢原毛平革菌(P.chrysosporium);对其次级代谢产物进行分离纯化,经结构确证该产物与Spirolaxine同质;经自然分离、紫外诱变和NTG诱变,得到突变菌株F1802-07-48-15,产量为1536.357 mg/L,遗传性能稳定。通过培养基优化和发酵条件的优化,Spirolaxine产生菌P.chrysosporium SIIA-F1802的产量达到3597.438mg/L,与自然分离菌株的初始产量(712.648 mg/L)相比提高了405.5%,具备工业化前景,为进一步药物研究提供了基础。
其他文献
视觉目标跟踪是当前计算机视觉领域重要的研究课题之一,已广泛应用于医疗、军事和工业等各种领域。尽管目标跟踪技术在近几十年来不断取得显著研究成果,但实际场景下的跟踪任务仍存在许多不可预知的因素可能会导致跟踪失败,例如快速运动、背景遮挡和运动模糊等。这类因素产生的主要原因是目标在两帧之间由于自身运动或摄像环境变化所引起的剧烈位置变化。因此,如何适应跟踪中出现的目标不确定运动成为实现长期跟踪的关键问题。然
本文将人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)与纳米粒(Nanoparticles,NPs)两者结合,制备了一种新型药物递送载体-白蛋白修饰的PLGA纳米载体(HSA/PLGA NPs),以喜树碱类抗肿瘤药物盐酸伊立替康(Irinotecan hydrochloride,CPT-11)为模型药物,制备了人血清白蛋白修饰的盐酸伊立替康PLGA纳米粒(HSA/PLGA/CPT-1
针对银杏蜜环口服溶液的原有标准WS1-XG-004-2001中银杏蜜环口服溶液及其原药材蜜环菌粉中多糖鉴别方法缺乏专属性及其含量测定误差大的问题,本文运用改良硫酸-苯酚法搭载酶标仪测定法与PMP-柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)对银杏蜜环口服溶液中多糖进行了质量控制研究,为银杏蜜环口服溶液标准再提高和多糖类药物质量控制提供思路和解决方法。针对传统硫酸-苯酚法测定总糖含量操作繁琐、重复性及可比性差
物联网的发展催生了智能家居、智慧城市、移动人群感知等新的信息化概念。由于网络的开放性,各种移动终端设备频繁地进行数据通信、信息交互以及资源共享,其被广泛应用于远程医疗、无人车辆驾驶、远程物理环境监测等领域。物联网的发展便利了人类的生活,但在用户隐私泄露、秘密共享数据泄露及资源越权访问等方面受到了严峻的挑战,现有的资源共享方案对隐私保护、共享数据的安全性及数据的访问控制考虑不足。针对这些问题,本文主
浓香型白酒作为中国传统蒸馏酒的典型代表,其生产方式采用独特的多菌种自发-固态发酵工艺,酒醅主要是指处于整个固态发酵过程中的多种物料混合物,其发酵结束后用于蒸馏制备原酒。酒醅作为白酒酿造过程中微生物的生长基质和白酒呈香物质的直接来源,其微生物菌群结构、生理活性及其代谢过程等直接影响白酒的品质。目前,大多数研究是使用DNA水平上的技术对浓香型酒醅发酵过程中菌群结构及功能进行解析,其结果并不能准确反映酒
药品作为一类可用于预防,治疗,诊断疾病的物质,其质量与人的生命健康息息相关。药物分析的相关研究正是对药品质量进行控制和研究的重要学科方向。随着人们健康意识不断增强,药品种类的不断增加以及对药物分析工作的要求的提高,药物分析的对象变得愈发复杂,分析任务也变得越来越艰巨。现有的药物分析技术和方法已逐渐不能满足药品质量控制和实际样品中药物分析的迫切需求,尤其是复杂基质样品中痕量药品组分检测的需求,寻找新
醋酸来法莫林,一种新型截短侧耳素类抗生素。2019年8月19日在美国批准上市,后又相继在欧盟和加拿大获批,适用于治疗成人社区获得性细菌性肺炎(CABP)。我国尚未进口该药,按照我国化学药品新注册分类规定,醋酸来法莫林属于三类新药。通过对相关文献资料查阅,发现世界主流药典(如USP、BP、JP、EP等)及其他标准中均未收载醋酸来法莫林原料药及其制剂的标准。因此,为保障用药的安全、有效,本论文建立了醋
城市文脉是城市建设的重要组成部分,体现一定的城市发展程度和城市文化风貌,但随着城市化进程的加快,诸多城市建设无法体现出城市文脉的地域性和独特性。因此研究通过城市中具有群众基础的民间艺术来展现城市文脉的特色,具有一定的理论和实践意义。本文从城市文脉的视野出发研究地方民间艺术在文化公园空间中的活化表达。城市的发展为民间艺术提供生存土壤,同时为民间艺术的发展提供资本和政策支持,而民间艺术也能为城市塑造文
我国一直是猪肉消费大国,伴随着猪肉需求量的增长,生猪养殖业开始快速发展,但是养殖户大多是小微主体。然而生猪养殖过程面临着饲料价格波动、疫情爆发、自然环境灾害等风险,生猪养殖的周期往往比较长,其回报时间较慢,养殖户经常面临着资金周转困难的难题。银行由于风控意识较强,养殖户贷款手续往往较为复杂,贷款金额较少,中小微养殖主体融资难、融资慢等问题一直有待解决。随着大数据、区块链、人工智能、物联网等金融科技
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是一种重要的革兰氏阴性条件性致病菌,常分离于免疫功能受损的患者病灶中。与其他常见致病菌相比,铜绿假单胞菌具有相对较大的基因组和较多的基因组成,有利于铜绿假单胞菌快速适应各种环境和宿主组织。众所周知,群体感应系统(Quorum-sensing,QS)在调控铜绿假单胞菌毒力因子的合成和释放过程中发挥着至关重要的作用。通过靶向抑制群体感应系统进