PTD4-Apoptin融合蛋白对人源非小细胞肺癌抑瘤效应的研究

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目的:以人源非小细胞肺癌A549、NCI-H1299细胞为肿瘤模型,通过体内外实验观察PTD4-Apoptin融合蛋白对人源非小细胞肺癌的抑瘤效应。方法: PTD4-Apoptin融合蛋白处理体外培养的人源非小细胞肺癌细胞A549、NCI-H1299和脐静脉血管内皮细胞HUVEC,采用MTT法检测细胞增殖、AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;建立人源非小细胞肺癌A549异种移植瘤裸鼠模型,采用PTD4-Apoptin融合蛋白瘤体皮肤表面涂抹方式治疗荷瘤裸鼠,同时设涂抹PTD4-GFP蛋白和PBS对照组,观察PTD4-Apoptin融合蛋白对A549荷瘤裸鼠肿瘤的生长抑制效果,HE染色观察PTD4-Apoptin组裸鼠主要脏器病理形态改变。结果:PTD4-Apoptin融合蛋白可抑制体外培养的A549和NCI-H1299细胞增殖并促使其凋亡,且呈现一定的量效关系。A549荷瘤裸鼠皮下瘤生长曲线显示,融合蛋白涂抹前治疗组和对照组的肿瘤体积大小不存在差异,经PTD4-Apoptin融合蛋白涂抹治疗后,PTD4-Apoptin治疗组裸鼠的肿瘤生长速度比对照组慢,治疗21天后,治疗组和对照组的瘤块体积的差异具有统计学意义,PTD4-Apoptin治疗组裸鼠主要脏器HE染色未见细胞形态发生明显改变。结论:PTD4-Apoptin融合蛋白可以通过诱导肿瘤细胞凋亡的方式抑制体外培养的人源非小细胞肺癌A549、NCI-H1299细胞的生长;PTD4-Apoptin融合蛋白可抑制A549荷瘤裸鼠肿瘤的生长。目的:探讨注射靶向ADAM10的shRNA对鼠源宫颈癌细胞U14荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法:建立宫颈癌U14昆明小鼠荷瘤动物模型,采用癌旁注射的方式将pGenesil1-ADAM10shRNA表达载体注入小鼠体内,以注射载有ADAM10干扰片断无意义序列HK的pGenesil4-HK shRNA和注射生理盐水为对照。注射21天后处死小鼠并剥离肿瘤,采用免疫组织化学染色法检测U14荷瘤小鼠肿瘤组织中ADAM10蛋白的表达,绘制肿瘤生长曲线。结果:注射pGenesil1-ADAM10shRNA质粒组、注射pGenesil4-HK shRNA质粒组和注射生理盐水组肿瘤生长速度明显不同,注射pGenesil4-HK shRNA质粒和注射生理盐水的对照组肿瘤生长速度明显比实验组快。免疫组织化学染色结果显示注射pGenesil1-ADAM10shRNA质粒的小鼠肿瘤组织内ADAM10蛋白的表达显著降低,而注射pGenesil4-HK shRNA和注射生理盐水组的瘤体组织中的ADAM10蛋白的表达不受影响。结论:注射pGenesil1-ADAM10shRNA质粒后能干扰U14荷瘤小鼠ADAM10蛋白的表达,进而抑制肿瘤细胞生长。
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