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凤眼果是一种广泛分布在日本、东南亚和我国华南地区的经济作物。人们习惯于将凤眼果种子用于食品工业中,而果壳作为加工副产物利用率不高。现有研究表明凤眼果壳含有多种酚类物质,对人体具有多种有益作用。因此,本文以凤眼果壳为主要研究对象,分析鉴定凤眼果壳中的活性成分,探究其提取物的抗氧化活性和抗增殖活性。主要结论和结果如下:(1)凤眼果壳粉末经过95%乙醇进行粗提取,过滤取上清为乙醇提取物(游离相),该提取物经不同有机溶剂分相萃取,分别得到正已烷相(HF)、乙酸乙酯相(EAF)、正丁醇相(BF)、水相(AqF)四相提取物。同时,滤渣经提取后得到结合相。然后通过福林酚法,硼氢化钠-四氯苯醌法测定各相提取物的总酚、总黄酮含量。结果表明,凤眼果壳的游离相多酚和黄酮含量比结合相的高,其中游离相多酚含量为 468.2±14.0 mg GAE/100 g DW,黄酮含量为 2063.5±38.4 mg CE/100 g DW。在极性不同的四相提取物中,多酚含量由高到低为EAF>AqF>BF>HF,黄酮含量由高到低为EAF>HF>AqF>BF。其中EAF的多酚含量和黄酮含量均最高,分别为1044.8±35.1 mg GAE/100 g DW 和 10507.0±201.4 mg CE/100 g DW。采用 UHPLC-HR-TOFMS技术分析,在EAF中鉴定出七种酚类化合物:分别是槲皮素、芦丁、槲皮苷、山奈酚、表儿茶素、异荭草苷和杨梅素。另外,利用对α-葡萄糖苷酶活性实验测定四相提取物的体外降血糖活性,发现HF的α-葡萄糖苷酶抑制率最高。进一步地,通过GC-MS鉴定出HF提取物的19种化学成份,其中,棕榈酸乙酯含量最多,十五烷酸次之,然后是亚油酸乙酯、反油酸乙酯和十七烷酸乙酯。(2)通过5种不同的方法对凤眼果壳的四相提取物进行抗氧化活性测定,结果表明在ORAC法、PSC法、DPPH自由基清除能力和还原力实验中,EAF具有最好的抗氧化活性,其ORAC值为 228.2 μmol TE/mg,PSC值为671.8μmol VCE/g,DPPH值为18.1 μmol VCE/mg,还原力大小的VC当量值为42.9 μmol VCE/mg。在ABTS实验中,AqF表现出最高ABTS自由基清除能力,VC当量值为154.5 μmol VCE/mg;其次是EAF,VC当量值为45.0 μmol VCE/mg。分析数据表明总酚含量与PSC法(r=0.951,p<0.05)和还原力法(r=0.992,p<0.01)的测定结果显著相关。此外,四相提取物的总黄酮含量与DPPH法测定结果之间存在显着相关性(r=0.952,p<0.05)。(3)测定EAF的抗增殖活性并对其机理进行探究。结果表明,EAF对HepG2、Caco-2、A549细胞的生长均具有显着的剂量依赖性抑制作用。EAF对不同癌细胞的抑制作用大小为HepG2细胞>Caco-2细胞>A549细胞。以HepG2细胞作为研究EAF抗增殖机理模型,发现EAF能增加G1/G0期的细胞数量百分比,同时增加HepG2细胞的凋亡细胞的比例。表明EAF对HepG2细胞的细胞周期阻滞主要发生在G0/G1期,同时可以诱导HepG2细胞凋亡。另外,高浓度(45-50μg/mL)的EAF能显著抑制HepG2细胞内ROS的产生。最后,通过RT-PCR的结果发现凤眼果壳的EAF可能是通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路来抑制HepG2癌细胞的增殖。