【摘 要】
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目的:多糖具有广泛的生理活性,寻找新的活性多糖对于医药领域具有重大意义。本文以菊糖为唯一碳源,液体发酵解淀粉芽孢杆菌并控制发酵条件,得到了三种新的多糖,对其中的一种多糖进行了结构解析和初步活性研究。方法:以菊糖作为唯一碳源发酵解淀粉芽孢杆菌,从发酵液中提取、分离纯化多糖,并进行结构表征研究,测定其生物活性。发酵条件:在28℃,用含有菊糖培养基振荡培养解淀粉芽孢杆菌72 h。分离纯化:发酵液-离心-
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目的:多糖具有广泛的生理活性,寻找新的活性多糖对于医药领域具有重大意义。本文以菊糖为唯一碳源,液体发酵解淀粉芽孢杆菌并控制发酵条件,得到了三种新的多糖,对其中的一种多糖进行了结构解析和初步活性研究。方法:以菊糖作为唯一碳源发酵解淀粉芽孢杆菌,从发酵液中提取、分离纯化多糖,并进行结构表征研究,测定其生物活性。发酵条件:在28℃,用含有菊糖培养基振荡培养解淀粉芽孢杆菌72 h。分离纯化:发酵液-离心-过0.22μm滤膜除菌→70%乙醇醇沉→大孔树脂脱色→sevage试剂脱蛋白→过DEAE-52柱→过Sephadex G200凝胶柱→透析-冷冻干燥→HPLC检查纯度。结构表征研究:HPSEC测定分子量、HPLC-MS测定单糖组成、甲基化实验和NMR法确定单糖的连接方式。生物活性测定:分光光度法测定α-葡萄糖苷酶抑制活性;羟自由基清除实验检测抗氧化活性;测定多糖对RAW264.7细胞增殖活性;测定多糖对CT26细胞抑制活性。结果:以菊糖为碳源发酵解淀粉芽孢杆菌得到的粗多糖产量为1.15 g/L。粗多糖分离纯化后得到三个组分,分别命名为PPBFI-1、PPBFI-2和PPBFI-3。PPBFI-2和PPBFI-3活性不明显,对PPBFI-1进行了详细研究。PPBFI-1对羟自由基清除力在8mg/mL时为86.90%（p<0.01）;对CT26癌细胞具有一定的抑制效果,在1.6mg/mL抑制率为15.44%（p<0.01）;对α-糖苷酶的抑制效果显著,在1.6mg/mL抑制率达到36.90%（p<0.01）;PPBFI-1（0.4mg/mL）可以显著刺激巨噬细胞RAW264.7的增殖,24 h增殖率超过300%（p<0.01）。对PPBFI-1组分进行了结构表征,PPBFI-1的单糖组成是岩藻糖、盐酸氨基半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖葡萄糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸,摩尔比是:0.011:0.068:0.133:0.158:0.031:0.255:0.030:0.184:0.130.且PPBFI-1的糖主链的连接方式是→6-β-D-半乳糖聚糖-1→6-β-D-半乳糖聚糖-1→6-β-D-半乳糖聚糖-1→2-α-L-鼠李糖-1→4-α-D-半乳糖醛酸-1→连接。结论:探讨了以菊芋多糖为碳源发酵解淀粉芽孢杆菌获得结构新颖多糖的途径。所获得的PPBFI-1具有潜在的应用价值。
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