七鳃鳗(Lampetra japonica)是最原始的脊椎动物之一,通常以宿主鱼类的血肉为食,推测其口腔腺分泌液可能含有阻止血液凝固的活性肽或蛋白质组分。前期研究结果表明七鳃鳗口腔腺分泌液经室温或37℃条件下温育后,分泌液可发生降解,但是其纤维蛋白原水解酶活性却显著增高(与未降解分泌液相比),能在短时间内快速降解纤维蛋白原的Aα链、Bβ链,以及γ链。这提示分泌液降解后产生了新的活性组分,且该高活性组分有可能来自于七鳃鳗自身,也有可能来自于口腔腺内寄生的细菌。为了阐明分泌液降解后纤维蛋白原水解酶活性增高的机制,本研究首次在无菌条件下从降解的口腔腺分泌液中筛选分离出一株具有高纤维蛋白原水解活性的菌株。这表明口腔腺分泌液降解后纤维蛋白原水解酶活性增高是由其内寄生细菌的胞外分泌液所引起的。通过形态学观察及16S rDNA鉴定确定该菌株为嗜麦芽寡养单胞菌,并将其命名为嗜麦芽寡养单胞菌LJ1菌株(Stenotrophomonas maltophilia strain LJ1)。本研究初步优化了嗜麦芽寡养单胞菌LJ1菌株的培养条件:最适温度为28℃、最适培养时间为48 h,最适培养体积为50 mL/500 mL(培养基/培养瓶容量)。通过硫酸铵沉淀、透析、冷冻干燥以及阴离子交换层析从嗜麦芽寡养单胞菌LJ1菌株的上清液中分离出一个分子量为44 kDa、具有较高纤维蛋白原水解酶活性的胞外蛋白酶,并将其命名为SMLJ1F(Stenotrophomonas maltophilia strain LJ1 fibrinogenase)。N末端测序结果显示SMLJ1F的N末端氨基酸序列为NH2-LAPNDPYYQQ。采用质谱鉴定该蛋白质并获得其随机片段的氨基酸序列为ETARPFPVAIPAATPIGTGILDAK、YRPASCDGVVTVGATR、ITGGITYYSNYGTR。后续功能研究发现SMLJ1F能够降解凝血级联反应中的多种蛋白,包括纤维蛋白原、纤维蛋白、凝血酶、纤维酶原等。这表明SMLJ1F不仅能够通过降解凝血酶或纤维蛋白原抑制血液凝固,还能通过降解纤维蛋白或激活纤溶酶原以促进已经形成的血栓溶解。此外,通过结合N末端测序和质谱鉴定结果对SMLJ1F进行了基因克隆,并成功获取SMLJ1F的核酸序列和氨基酸序列,为后续深入研究SMLJ1F的结构与功能奠定了基础,更为今后利用其开发新型抗凝溶栓药物提供了理论支撑,具有很多潜在的应用领域。