硝化抑制剂评价方法与新型硝化抑制剂合成及应用效果研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyqtc1989
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硝化抑制剂由于其延长氮肥肥效、提高氮肥利用率、环境友好等特点,成为氮肥增效的重要手段之一,提高硝化抑制剂效果的研究一直是国内外研究的热点。随着硝化抑制剂应用范围的不断增加,对其进行合理地评价,并改进成为迫切需要解决的问题。本试验创建了一套准确评价硝化抑制剂效果的试验方法,通过氨氧化细菌模式菌株抑菌试验、恒温土壤培养试验,温室作物盆栽试验和大田试验构成,系统研究硝化抑制剂在体外环境、土壤环境和作物栽培环境对氨氧化细菌的抑制作用,并探讨了硝化抑制作用对土壤氮肥转化和作物增产效果的影响,验证了评价方法的可行性。同时,本试验制备了3,4-二-甲基吡唑磷酸盐(DMPP)的改进型锌配位3,4-二-甲基吡唑(DMS),以DMPP和双氰胺(DCD)做标准,在本评价方法中评价了DMS的实际效果。主要研究结果如下:(1)氨氧化细菌模式菌株抑菌试验评价了DMPP、DCD和2-氯-6-三氯甲基吡啶(NP)的抑菌效果。试验结果表明:DMPP和NP效果好于DCD,在0.1%的浓度下有效抑制细菌的生长,DCD需要10%的高浓度才能达到较好效果。与DMPP相比,NP在较低浓度的情况下抑菌效果快速降低,其0.05%的硝化抑制率与0.025%DMPP处于同一水平。综合评价DMPP的效果最为稳定,可以在较低浓度的条件下抑制氨氧化细菌的生长。该试验可以有效、快速评价硝化抑制剂的实际抑菌效果,为实际应用提供理论依据。(2)本试验以RT-PCR测定土壤中涉及硝化作用的氨氧化细菌(AOB)和氨氧化古菌(AOA)的amo A基因的拷贝数标定两种细菌的丰度。该方法可以有效检测不同土壤中的氨氧化细菌的丰度,为硝化抑制剂抑菌效果的评价提供有效手段。通过土壤培养试验检测DMPP在同一地理区域的不同位置土壤的硝化抑制效果,发现DMPP的硝化抑制效果和其抑菌效率呈正相关。说明相比硝化抑制率,土壤中硝化抑制剂的抑菌效果是决定其硝化抑制效果的主要因素,是本评价方法重要的评价指标。(3)本试验制备了DMPP的改进型硝化抑制剂DMS,其微溶于水,在肥料中拥有更好的稳定性,并在土壤中存在时间更长,可以提高硝化抑制效果。通过体外氨氧化细菌抑菌试验验证了DMS具有与DMPP同等的抑菌能力。(4)本试验以DMPP和DCD为标的物,验证DMS在两种不同AOB和AOA土壤的恒温培养和作物盆栽试验的效果。结果表明:AOA对氮肥和硝化抑制剂均没有明显响应,表明在供试土壤中其对土壤硝化作用影响很小。棕壤土上,硝化抑制剂对氮肥的增效和作物增产效果不明显,而黑土上结果正好相反,造成这种差别的主要原因是土壤中AOB的丰度差别:棕壤土的AOB丰度仅为黑土的1/10,其AOB在土壤的氮转化过程中不能起到主要作用,导致即使抑制了AOB,也没有显著提高土壤中氮的含量。因此,试验体系中选择高AOB丰度的适宜土壤是验证成功的关键。(5)在黑土上,DMS的效果好于DMPP和DCD,显著提高了氮肥的利用率,提高了作物的产量。并且其在试验的中后期促生作用更加明显,说明与DMPP相比DMS具有长效的优点。在同样黑土进行的田间试验中,DMS的增产效果好于DMPP,其最佳添加量为施氮量的1%,最低有效添加量为氮肥施用量的0.5%。
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