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梅花（Prunus mume Sieb.et Zucc.）属于蔷薇科（Rosaceae）李属（Prunus）的落叶小乔木,是我国的传统名花。虽然梅花具有较强的抗寒性,但能在我国北方露地越冬的品种缺乏。利用遗传转化技术定向培育抗寒性增强的梅花品种,能扩大梅花的种植范围,以及梅花在我国北方园林中的应用。本研究以‘雪梅’ב粉皮宫粉’杂交种的子叶为实验材料,在前人的研究基础上探究了基本培养基、BA和IBA浓度、基因型、胚处理方式、种子贮存时间等对梅花子叶再生的影响,改善了未成熟胚子叶诱导出的不定芽生长状态,提高了成熟胚子叶的不定芽再生率,初步探索出继代时间与梅花再生苗生根的关系;同时以未成熟胚和成熟胚子叶为受体材料,将Pm CBFs基因转入梅花,成功获得了下地栽培的Pm CBFs超量表达的梅花转化植株。主要研究成果如下:（1）分析了基本培养基和BA浓度对梅花未成熟胚子叶再生的影响,结果显示BA浓度对梅花未成熟胚子叶的再生有极显著作用,BA浓度为2.0 mg/L时再生率最高,达77.08%,但诱导出的再生芽后期叶片无法正常展开;而2种基本培养基1/2 MS和QL对梅花子叶再生的影响不显著;筛选得到的最佳未成熟胚子叶再生培养基为1/2 MS+BA 1.0 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+IBA 0.5 mg/L;（2）比较了IBA浓度、胚处理方式、基因型、贮存时间对梅花成熟胚子叶再生的影响,结果表明:IBA浓度对梅花成熟胚子叶再生的影响极显著,IBA浓度为1.0mg/L时子叶再生率最高,为61.73%,但高浓度的IBA会导致子叶产生过多的愈伤组织而影响不定芽生长,选定0.8mg/L的IBA为最适宜浓度,优化所得的成熟胚子叶再生培养基为QL+BA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.8mg/L+CH 500 mg/L;胚处理方式对成熟胚子叶再生的影响显著,胚处理方式II（挑除胚芽、胚轴、胚根）优于胚处理方式I（切除胚芽、胚轴、胚根）;梅花成熟胚子叶的再生率与基因型显著相关,从6个基因型中筛选出3个再生率高的株系10-2、11-1、12-1,其再生率分别为67.06%、64.44%、58.11%;随着贮存时间延长成熟胚子叶的再生能力快速降低,当贮存时间为10d时成熟胚子叶平均再生率最高,为55.72%,70d时子叶再生率下降至38.88%,贮存时间为130d时子叶再生率最低,仅有13.97%。（3）初步探索了继代时间对梅花试管苗生根的影响,当试管苗继代时间达到120d-150d,可在QL+BA 0.1 mg/L+IBA 0.05mg/L+CH 500 mg/L培养基中自然生根,而继代时间过短的试管苗很难生根。（4）以梅花未成熟胚和成熟胚子叶为受体材料进行了以根癌农杆菌介导的Pm CBFs遗传转化,将未成熟胚子叶接种于1/2 MS+BA 1.0 mg/L+TDZ 0.2 mg/L+IBA0.5 mg/L培养基中,成熟胚子叶接种于QL+BA 0.5mg/L+TDZ 1.0mg/L+IBA 0.8mg/L+CH 500mg/L培养基中,暗培时间分别为3d、4d,侵染时间为15min、20min,置于上述附加100μmol/L AS的共培养基中黑暗培养3d,延迟筛选7d-10d,在Km25mg/L+Cef 300 mg/L+Tm 300 mg/L筛选压下选择培养90d后进行PCR阳性检测。在此遗传转化体系下,共处理未成熟胚子叶外植体2048个,获得抗性芽87个,对其中20个进行PCR检测,10个呈阳性;处理成熟胚子叶外植体2529个,获得抗性芽104个,对其中伸长的86个进行PCR检测,有48个呈阳性。完成了6株成熟胚子叶转Pm CBFs阳性植株的生根培养,其中转PmhCBFb和PmhCBFc植株各下地成活1株。（5）对下地成活的转PmhCBFc梅花植株进行RT-PCR检测后显示PmhCBFc基因在转基因梅花中超量表达,经过-2.5℃低温胁迫处理后测定转PmhCBFc梅花植株相对电导率为14.83%,对照组为63.74%,具有显著差异。