解淀粉芽胞杆菌B-36防治子莲腐败病效果研究

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子莲在我国多个地区广泛种植,镰孢菌侵染而诱发的腐败病危害较为严重,对其生产造成重大损失。子莲腐败病病原种类多样,镰孢菌属(Fusarium spp.)多个种为子莲腐败病的主要病原菌。目前子莲生产中防治腐败病以化学药剂为主,而随着人们对食物质量和食品安全的重视,需探究一种绿色环保、高效的方法防治子莲腐败病。芽胞杆菌是生物防治中普遍应用的一种生防细菌,抑菌活性高效、广谱,在多种植物的病虫害防治中都表现出较好效果。此外芽胞杆菌能够稳定定殖于植株内,因此可以通过接种使芽胞杆菌在植物内定殖,进而预防植物病害。基于上述研究背景,本文研究了芽胞杆菌在子莲内的分布情况,测定了不同接种方法和接种量下抑菌高效菌株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)B-36对子莲腐败病的预防、治疗及促生效果,同时对适于芽胞杆菌在子莲内稳定定殖的接种量和接种方法进行了探究。得出下列结果:1.通过科赫氏法则分离并验证得到两株病原镰孢菌,通过形态学和分子水平鉴定得出镰孢菌F37为木贼镰孢菌(Fusarium equiseti)、镰孢菌F-8为尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)。其中尖孢镰孢菌为主要的莲藕腐败病病原菌,是诱发植物发生腐败病的常见镰孢菌;木贼镰孢菌侵染子莲,诱发腐败病的发生,在生产中较为少见。2.子莲的多个组织均分离到芽胞杆菌,不同的组织部位分离频率各不相同,其中子莲叶片、叶柄和根茎中芽胞杆菌的分离频率较高,3个部位所占比例之和达到82.27%;莲子中存在的芽胞杆菌比较少,分离比例仅占1.27%。复筛得到的芽胞杆菌B-36发酵液的无菌滤液具有较高的抑菌率,在5%的低浓度下就能表现出较高的抑菌效果,发酵液浓度设置为20%的处理中抑菌率达到90.46%,B-36挥发性气体抑菌率低于20%。通过菌落形态特征及分子鉴定得出B-36为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。3.通过喷雾和注射两种接种方式测定了不同接种方法和接种量下芽胞杆菌B-36对子莲腐败病的预防和治疗效果。其中800μL/株处理中治疗效果最高达到53.52%,预防效果最高达到43.51%;相比喷雾多菌灵,菌株接种处理持效期较长;喷雾接种防效与低剂量注射防效差异不大,生长前期低于阳性对照组,随着生长时间的增加,各组间防效差异减小;生长中,芽胞杆菌B-36接入对子莲叶柄高度、叶柄直径、立叶比例具有明显的促进作用,个别指标相比对照达到显著性差异。4.芽胞杆菌B-36能通过接种的方式在子莲内定殖。喷雾接种、浸种接种和低剂量注射接种后,芽胞杆菌的标记性菌株能在子莲茎、叶柄和叶内稳定定殖,种群密度达到10~2CFU/g-10~3CFU/g水平。
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