Rab1A的表达和结肠癌细胞增殖和迁移侵袭能力的相关性

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目的:  探索Rab1A基因在结直肠癌中的表达情况,通过调控Rab1A基因的表达,研究调控Rab1A表达后对结肠癌细胞株的增殖、迁移、侵袭能力的影响,为Rab1A成为结直肠恶性肿瘤个体化治疗的重要靶点提供依据。  方法:  通过免疫组织化学方法(Immunohistochemistry,IHC)检测100例结直肠癌组织及癌旁正常组织中Rab1A的表达情况,通过实时定量PCR技术检测15例结直肠组织(其中包括正常上皮组织、腺瘤以及腺癌组织分别五例)中Rab1A的mRNA表达情况,通过检索Oncomine综合分析Rab1A基因在结直肠癌、结直肠黏膜内癌及正常结直肠组织的表达情况。通过蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)检测常见的六种结肠癌细胞株Rab1A蛋白表达情况,筛选出Rab1A高表达的细胞株,通过si-RNA靶向下调Rab1A高表达细胞株,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、Transwell实验及划痕实验被用来评估细胞的增殖和迁移侵袭能力。  结果:  我们通过免疫组化技术检测了100例结直肠癌及29例癌旁组织中Rab1A的表达,发现Rab1A基因的表达在肠癌组织中显著高于正常组织(癌旁组织),Rab1A在结直肠癌和癌旁标本中的阳性率分别为 78%和 24%,有明显差异,具有统计学差异(p<0.001)。接着通过检索Oncomine综合分析表明Rab1A在结直肠癌中表达明显高于正常组织,进一步亚组分析,发现在结肠黏膜内癌和直肠黏膜内癌中 Rab1A 的表达强于正常结肠组织,差异具有统计学意义,p值分别为0.032、0.015。随后通过定量PCR技术检测15例结直肠标本(正常组织、腺瘤、结直肠癌各5例)中Rab1A基因的mRNA表达情况,发现Rab1A在结直肠癌组织表达明显高于正常组织和腺瘤组织,而 Rab1A 的表达在正常组织和腺瘤之间未见明显差异。此外,通过 Western blotting发现SW480表达较高,通过靶向下调Rab1A表达后显著抑制SW480细胞的增殖和迁移侵袭能力。  结论:  Rab1A是结直肠癌致癌基因,靶向下调Rab1A基因表达后显著减弱肠癌细胞株的增殖和迁移侵袭能力,Rab1A有望在结直肠癌的早期诊断上成为新的生物分子及个体化治疗中成为新的靶点。
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