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目的:研究冻存人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)异体移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的修复作用。
方法:96只7日龄SD新生大鼠随机分为正常对照组(n=24)、HIBD组(n=24)、新鲜hUC-MSCs移植组(n=24)、冻存hUC-MSCs移植组(n=24),HIBD组和移植组Rice法制作HIBD模型,术后3天分别将相同体积的生理盐水、新鲜、低温冻存复苏的hUC-MSCs经立体定向仪移植到乳鼠左侧脑室。注射前48小时(5-溴脱氧尿苷)Brdu标记细胞。术后通过组织切片HE染色、免疫荧光染色鉴定细胞的存活,感觉运动功能测试,脑大体病变观察评定大鼠功能恢复情况。
结果:1.复苏后hUC-MSCs增长速度较新鲜hUC-MSCs明显增快,且先进入对数生长期;2.移植后脑组织HE染色结果显示:细胞移植组与HIBD组比较,海马及大脑皮质区的神经元及少突胶质细胞明显增多,组织结构相对清晰;3.免疫荧光结果显示,移植后的hUC-MSCs可以存活并向损伤部位迁移,并在组织中存活至少4周;4.感觉运动功能测试结果显示:四组比较差异有统计学意义(P<0.01),移植组较HIBD组有明显改善(P<0.05),两个移植组间比较差异无统计学意义(P>0.05);5.移植组脑病变率低于HIBD组(P<0.05),而两个移植组比较脑病变率无明显差异(P>0.05)。
结论:冻存hUC-MSCs复苏后仍具有活跃的增殖和分化潜能,异体移植治疗新生大鼠HIE,可促进大鼠感觉运动功能恢复,是HIE移植治疗有价值的细胞资源,可建立脐带库,实现终身干细胞移植。