乳酸菌拓扑异构酶parC基因突变与耐喹诺酮类抗菌药的相关性

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本研究以内蒙古锡林郭勒牧区马奶和马奶酒中分离的15株乳酸菌为研究对象,首先,通过生理生化特性研究,发现15株试验菌株均有一定的耐盐性,可在含盐量为6.5%的环境下旺盛生长,耐热性和耐胆盐性良好,在pH4.5-9.6的环境下均可生长。其次,通过16S rRNA序列分析结合生理生化鉴定得出:4株为Enterococcus dispar(异肠球菌),2株为Enterococcus raffinosus(棉籽糖肠球菌),2株为Enterococcus gilvus,其余3株分别为Enterococcus italicus(意大利肠球菌)、Enterococcus durans(坚强肠球菌)、Enterococcus villorum。通过对比3种方法对氟喹诺酮类药物的敏感性检测结果,证明纸片法和打孔法之间差异不显著,牛津杯法与纸片法、打孔法之间差异显著(P<0.05)。3种方法标准差平均值:打孔法<牛津杯法<纸片法,说明纸片法试验的重复性较差、试验误差偏大,牛津杯法的误差相对较小,打孔法试验的误差最小、准确度更高。打孔法适用于乳酸菌对喹诺酮类药物的敏感性检测。用打孔法、纸片法检测15株乳酸菌对氧氟沙星和诺氟沙星有不同程度的敏感性:6株为耐药菌株;8株为敏感菌株;菌株NN打孔法为耐药,纸片法为中度敏感。MIC值法检测15株乳酸菌的敏感性,结果显示:对抗菌药氧氟沙星3株为中度敏感,其余菌株为耐药;对抗菌药诺氟沙星1株为耐药敏感菌株,5株为中度敏感;其余试验菌株为耐药。试验通过对敏感菌株、中度敏感菌株、耐药菌株的Ⅱ型拓扑异构酶中拓扑异构酶ⅣparC基因进行PCR扩增、测序、比对得出:耐药菌株、中度敏感菌株和敏感菌株的拓扑异构酶ⅣparC基因的在QRDR区无变化,乳酸菌对喹诺酮类药物的耐药性与菌体拓扑异构酶ⅣparC基因的突变无直接相关性。
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