降香黄檀炭疽病内生拮抗细菌筛选及苗木保健剂研制

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降香黄檀(Dalbergia odorifera T Chen.)是我国珍贵的热带乡土树种之一,近年来对降香黄檀的市场需求量增大,大量栽植降香黄檀人工林,但病虫害问题也日益突出,炭疽病是降香黄檀最主要的病害之一。目前关于降香黄檀炭疽病的防治主要以化学防治为主,尚无微生物防治的报道。本论文主要开展降香黄檀健康叶片中高效内生拮抗细菌的分离和诱变并用于炭疽病的防治、发酵条件优化、苗木保健剂研制,以期为降香黄檀炭疽病生物防治和促进苗木生长提供参考。主要研究结果如下:(1)降香黄檀炭疽病拮抗细菌的筛选与鉴定。课题组从海南国营澄迈林场的健康降香黄檀叶片中分离纯化得到51株对炭疽病菌有拮抗活性的内生细菌,经过平板初筛、发酵液复筛得到一株抑菌率为78.48%的内生细菌,编号为JXYJ1-14。经形态学观察、生理生化测定和16S rDNA序列分析鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。对拮抗细菌进行紫外诱变,结果显示诱变细菌对降香黄檀炭疽病菌的抑菌率最大达93.37%,比诱变前提高了 1 8.97%。连续传代5次显示该诱变细菌能稳定遗传,编号为JXYJ1-14UV。对JXYJ1-14UV的生物效果进行盆栽实验,结果表明JXYJ1-14UV发酵液100倍液对降香黄檀炭疽病的防治效果达65%以上,幼苗苗高比对照增加9.97%,地径比对照增加12.52%。(2)降香黄檀炭疽病拮抗细菌JXYJ1-14UV发酵条件优化。通过单因素实验和正交设计实验得到菌株JXYJ1-14UV的最适培养基组成为1%葡萄糖、0.5%牛肉膏、1%酵母膏和0.5%氯化钠,最佳培养条件为初始pH 7.0,250ml锥形瓶装液量80ml,5%接种量,38℃、180r/min培养60h。(3)降香黄檀苗木保健剂研制。通过单因素实验和正交试验,确定JXYJ1-14UV可湿性粉剂的最佳配方为:原药70%、高岭土 10%、润湿剂十二烷基硫酸钠4.5%、分散剂木质素磺酸钠6.0%,稳定剂聚乙二醇1.6%、高岭土补足至100%。该菌剂在室温和4℃下均至少可保存3个月。采用同样方法,获得保健剂各组分的比例(质量分数)为:JXYJ1-J 4UV可湿性粉剂71.88%、赤霉素0.16%、保水剂11.98%、菌糠15.97%。对优化后的保健剂组分进行田间实验,结果表明优化后的保健剂对降香黄檀炭疽病的防治效果达73.98%,降香黄檀高生长比对照提高了22.41%,地径生长比对照提高了28.12%。
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