绞股蓝为葫芦科绞股蓝属植物Gynostemma pentaphyllum（Thunb.）Makino的干燥全草,是多年生草本植物,我国拥有很丰富的资源,主要产于长江以南及陕西、甘肃等地。绞股蓝的主要活性成分为皂苷类,其骨架与人参皂苷相似,具有延缓氧化、抗肿瘤、降血糖、调血脂、护肝、抑制肥胖和增强免疫力等多种功能。近年来有代谢研究表明,人参皂苷在体内经过水解反应最终代谢生成极性小、便于吸收、生物活性更强的次级皂苷和苷元。因此,为了寻找比皂苷具有更高活性、更低毒性的苷元,本实验对绞股蓝总皂苷的酸水解产物进行了系统的分离研究及活性评价。对绞股蓝总皂苷进行酸水解处理,得到了酸水解产物。然后采用反复硅胶柱色谱法,以石油醚-丙酮为流动相,分离得到了9个化合物。再根据理化性质,通过¹H-NMR、¹³C-NMR等NMR波谱学测试手段及数据库,结合HR-ESI-MS等技术,确定了它们的结构,分别为gypensapogenin A（1）、20（S）-人参二醇（2）、gypensapogenin F（3）、α-菠菜甾醇（4）、（23S）-3β-羟基达玛-20,24-二烯-21-羧酸21,23-內酯（5）、gypsapogenin A（6）、（20S,24S）-3β,20,21β,23β,25-五羟基-21,24-环氧达玛烷（7）、20（R）-原人参二醇（8）和?-谷甾醇（9）。通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力（DPPH）、2,2’-联氨-二（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐自由基（ABTS⁺·）、超氧自由基排除能力（PSC）三种体外抗氧化方法评价绞股蓝总皂苷及酸水解产物及化合物的抗氧化活性。实验表明,被测化合物都呈现抗氧化能力,但其抗氧化能力明显弱于阳性对照维生素C（Vc）的抗氧化活性。采用α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选方法、蛋白酪氨酸磷酸化酶1B抑制剂筛选方法测定八个化合物对α-葡萄糖苷酶、蛋白酪氨酸磷酸化酶1B的抑制作用对其降血糖活性进行研究。结果表明,8个化合物均有α-葡萄糖苷酶抑制活性,抑制率与剂量呈现一定的依赖性。其中,化合物1和化合物5两种化合物活性最高,并呈现一定的浓度依赖性。IC₅₀值分别为10.73μM、2.50μM,高于阳性对照药物阿卡波糖的抑制活性;各单体化合物均有蛋白酪氨酸磷酸化酶1B抑制活性,并且抑制率与剂量呈正相关,其中化合物1和化合物5降糖活性最好抑制率达到,IC₅₀值分别为10.77μM、8.84μM,高于阳性对照药物钒酸钠的抑制活性。采用Lineweaver-Burk图确定化合物1和化合物5对α-葡萄糖苷酶的抑制类型为竞争性抑制,对PTP1B的抑制类型也为竞争性抑制。通过分子对接来探讨化合物与PTP1B空间结合模式,从整体图中可以看出化合物与蛋白有结合。从2D示意图可以看出化合物5与PTP1B相结合的氨基酸残基分别为:Tyr-46、Cys-215、Phe-182、Lys-120、Val-49、Ile-219、Met-258。但从局部三维空间图来看,化合物5与活性口袋并没有完全结合,后续通过合成或分离制备与PTP1B活性口袋充分填充来提高化合物活性促进其降糖效果的研究更具有意义。本实验证明了从绞股蓝总皂苷酸水解产物中分离得到的化合物对降血糖发挥着潜在的作用,找到了具有降糖活性的功能因子并深入研究了其与PTP1B活性口袋填充效果,为寻找结构新颖、活性更强的先导化合物,从而成为防治糖尿病、肥胖等代谢疾病的功能因子开发成保健品提供了重要的理论依据。