论文部分内容阅读
目的:观察流感病毒(Influenza virus,IFV)感染后患儿呼吸道上皮细胞中λ1干扰素(Interferon-λ1,IFN-λ1)的表达水平以及其与流感病毒载量的关系,比较不同病毒(甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒及鼻病毒)感染后患儿呼吸道上皮细胞中IFN-λ1表达水平的差异,以评估IFN-λ1在儿童呼吸道病毒感染中的作用。方法:1、收集从2017年10月至2019年1月在湖南省人民医院儿童医学中心门诊就诊考虑急性呼吸道感染病人的标本,标本采集时选取双侧鼻咽拭子各一份,所有的标本加入2mL病毒保存液以便保存,选择其中一份行11种呼吸道病原体(腺病毒、鼻病毒、百日咳杆菌、呼吸道合胞病毒、肺炎衣原体、肺炎支原体、甲乙型流感病毒、副流感病毒1-3型)进行核酸检测,另一份则用于细菌真菌培养,筛检出单纯甲型流感病毒(influenza a virus,IFVA)阳性标本100份和单纯乙型流感病毒(influenza b virus,IFVB)阳性标本99份分别作为IFVA感染组、IFVB感染组,挑选单纯呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)阳性标本92份及单纯鼻病毒(human rhinovirus,HRV)阳性标本90份分别作为RSV感染组及HRV感染组,同时收集湖南省人民医院门诊健康体检儿童的双侧鼻咽拭子标本,检测了11种呼吸道病原体及细菌真菌培养均阴性的健康儿童共56例作为健康对照组。2、通过问卷调查方式填写患儿资料,以获取流感病毒感染患儿的临床数据。3、采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法获取健康对照组、RSV感染组、IFVA感染组、IFVB感染组及HRV感染组的IFN-λ1mRNA、管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)mRNA、IFVA mRNA及IFVB mRNA,比较健康对照组、IFVA感染组、IFVB感染组、RSV感染组及HRV感染组IFN-λ1表达水平的差异,以及了解流感病毒与IFN-λ1之间的关系。结果:1、IFV感染组IFN-λ1表达水平显著高于健康对照组(t=24.00,P<0.05);IFVA感染组和IFVB感染组IFN-λ1表达水平均显著高于健康对照组(t=25.50,P<0.05)(t=20.23,P<0.05)。2、IFV感染组IFN-λ1表达水平各性别组间无显著差异(t=0.41,P>0.05);IFVA感染组和IFVB感染组中IFN-λ1表达水平各性别组间均无显著差异(t=0.71,P>0.05)(t=0.08,P>0.05)。3、IFV感染组IFN-λ1表达水平各年龄组间无显著差异(F=2.02,P>0.05);IFVA感染组和IFVB感染组中IFN-λ1表达水平各年龄组间均无显著差异(F=0.62,P>0.05)(F=2.34,P>0.05)。4、IFVA感染组IFN-λ1表达水平显著高于IFVB感染组(t=2.41,P<0.05)。5、IFVA感染组和IFVB感染组的IFN-λ1表达水平分别与其病毒载量无显著相关性(r=-0.018,P>0.05)(r=-0.045,P>0.05)。6、IFVA感染组、IFVB感染组、RSV感染组及HRV感染组IFN-λ1的表达水平分别为3.96±0.37、3.83±0.44、3.22±0.67、2.68±0.40,IFVA感染组IFN-λ1表达水平显著高于RSV感染组及HRV感染组(t=9.66,P<0.05)(t=22.99,P<0.05);IFVB感染组IFN-λ1表达水平显著高于RSV感染组及HRV感染组(t=7.47,P<0.05)(t=18.65,P<0.05)。结论:甲乙型流感病毒感染后均可诱导IFN-λ1的表达,但流感甲乙型之间,以及流感病毒与呼吸道合胞病毒、鼻病毒之间诱导IFN-λ1的表达存在差异,提示IFN-λ1在流感发病机制中可能起一定作用,各病毒感染时IFN-λ1所起的作用强度可能不一。