微小隐孢子虫(Cyptosporidium parvum,C.parvum)是一种寄生于细胞内的机会性致病原虫,该病原体能感染包括人在内的脊椎动物胃肠道上皮细胞。对于免疫功能正常的宿主,微小隐孢子虫仅呈急性感染并具自限性,然而对于免疫力低下的人群,如艾滋病人和婴幼儿,感染往往比较严重甚至会威胁到生命。最近流行病学研究显示,隐孢子虫是导致2岁以下儿童腹泻的重要病原体。并且有研究指出,隐孢子虫感染与儿童营养不良和生长缺陷相关,即使是无感染症状也与生长缓慢相关。然而在中国,特别是中部地区,对婴幼儿腹泻中隐孢子虫的感染情况了解甚少,本论文的第一部分运用分子生物学的方法检测武汉市2岁以下腹泻婴幼儿中隐孢子虫感染率及其感染的主要虫种。我们共收集到298份婴幼儿腹泻患者的粪便样本。经巢式PCR扩增技术检测,298份样品中有9份扩增出隐孢子虫阳性条带,阳性率为3.02%(9/298),其中1～2岁腹泻幼儿阳性率为5.93%(7/118),1岁患儿的阳性率为1.11%(2/180),差异有统计学意义(χ2=4.13;P<0.05)。9份阳性PCR产物经测序后与GenBank上的参照序列进行比对,结果显示7份样本为微小隐孢子虫感染,2份样本为微小隐孢子虫与人隐孢子虫混合感染。绘制种系发育进化树发现,9条SSU rRNA基因序列与已发表的微小隐孢子虫位于同一个进化支上。另一方面,隐孢子虫感染是导致艾滋病人死亡的重要原因之一。人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)编码的Tat(Trans-activating)蛋白是一种重要调控蛋白,在病毒复制和感染致病中起重要作用。并且,Tat蛋白还可以释放到细胞外,影响未被HIV感染细胞的功能。细胞外释放的Tat作为一种多效性分子,可以诱导不同的靶细胞产生多种生物效应,在艾滋病发病机制中担任着重要的角色。并且有研究表明,Tat蛋白可以增强感染机会性致病病原体的机会。然而,Tat蛋白对微小隐孢子虫感染的影响及其分子机制目前尚不清晰。本论文的第二部分探讨Tat蛋白对微小隐孢子虫感染的影响。研究结果发现,使用含有HIV Tat的质粒转染细胞可以增强微小隐孢子虫的感染。并且发现在HIV Tat作用下微小隐孢子虫感染后抗病原生物相关因子iNOS的表达量下降。在对其分子机制的研究中,发现Tat蛋白通过调节miR-27b的表达,从而影响KH-型剪接调控蛋白(KH-type splicing regulatory protein,KSRP)的表达。KSRP作为一种RNA结合蛋白,可以与3’UTR区域中的ARE结构结合,调控iNOSmRNA的稳定性,从而影响上皮细胞抗病原生物防御机制,导致微小隐孢子虫感染加重。该分子机制的阐明也可以有助于解释艾滋病人更易感染其他机会性致病病原体这一普遍现象。