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氟苯尼考是化学合成的第三代氯霉素抗菌素,具备广谱、高效、安全、动物专用等特点,在水产养殖业有了较为广泛的应用。本课题在建立克氏原螯虾组织中氟苯尼考及其主要代谢产物氟苯尼考胺定量分析方法的基础上,开展了氟苯尼考在克氏原螯虾体药动学和残留研究,为氟苯尼考在克氏原螯虾养殖中的合理应用和安全性控制提供理论依据。
采用液液萃取和固相萃取技术建立了氟苯尼考及其主要代谢产物氟苯尼考胺在克氏原螯虾组织中的高效液相色谱法。氟苯尼考和氟苯尼考胺在血淋巴、肌肉、肝胰脏的检测限分别为0.01mg/L和0.015mg/L,0.02mg/kg和0.03mg/kg、0.03mg/kg和0.05mg/kg;组织的加标回收率为78.8~94.2%,相对标准偏差小于8.16%。在0.025~20mg/kg范围内,血淋巴的线性回归方程分别为Y=114.31+0.951, r=0.99915,Y=93.71X+0.771,r=0.99983。在0.05~10mg/kg范围内,氟苯尼考和氟苯尼考胺在肌肉的线性回归方程为Y=110.42X-0.355,r=0.99986,Y=91.12X+0.352,r=0.99873,在肝胰脏的线性回归方程为Y=109.90X-0.138,r=0.99969,Y=91.53X+0.366,r=0.99968。该方法适用于氟苯尼考在螯虾体内的药代动力学研究和氟苯尼考及氟苯尼考胺在其组织中的残留检测。
在试验水温21±1℃时,分别按20mg/kg和50mg/kg剂量对克氏原螯虾进行血窦注射和口灌氟苯尼考,采用高效液相色谱法检测血淋巴中氟苯尼考和氟苯尼考胺的含量,3p97软件非房室模型分析药时数据,研究氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺在克氏原螯虾体内的药动学特征。血窦给药后,氟苯尼考的消除半衰期(T1/2)、表观分布容积(Vd(ss))、总体清除率(CL)分别为8.26h、14.43L/kg、1.21L·kg/h,氟苯尼考胺消除半衰期和代谢率(MR)分别为20.28h、9.3%;口灌给药后,氟苯尼考达峰浓度(Cmax)、达峰时间(Tmax)、消除半衰期、生物利用度(F)分别为2.49mg/kg、1h、10.01h、21.6%,氟苯尼考胺的消除半衰期和代谢率分别为16.0h、37.5%。
对克氏原螯虾按50mg/kg剂量单次口灌氟苯尼考后,分别于6、8、12、18、24、36h采样,每时间点取样4只,检测其肌肉和肝胰脏中的氟苯尼考和氟苯尼考胺含量。结果表明,氟苯尼考在肝胰脏中消除半衰期为16.9h,低于氟苯尼考在肌肉中的消除半衰期21h,氟苯尼考胺在两组织的消除速率相差不大。肝胰脏中标示残留物(氟苯尼考和氟苯尼考胺之和)的含量高,消除慢,是残留检测的靶组织。若规定标示残留物在螯虾可食组织中残留限量为0.1mg/kg,建议休药期不小于5d。