白杨素联合洛铂对人肺腺癌A549细胞作用机制的研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoyaya310
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目的:体外研究白杨素(Chyrsin,Chy)联合洛铂(Lobaplatin,Lob)对人肺腺癌A549细胞株的增殖、凋亡以及Bax、Bcl-2表达的影响。并且进一步探究白杨素联合洛铂在抑制人肺腺癌A549细胞增殖、诱导凋亡方面的机制。材料与方法:体外培养人肺腺癌A549细胞。(1)不同浓度的白杨素(0、5、10、20、40、80mmol/L)、洛铂(0、2.5、5、10、20、40mmol/L)分别在24h、48h、72h下处理人肺腺癌A549细胞,CCK-8法检测细胞增殖率,并由此确定白杨素的48h半数有效抑制浓度(42.276±0.544μg/ml)及洛铂的48h半数有效抑制浓度(18.596±2.074μmol/L),用于后续实验;(2)白杨素(IC50)及洛铂(IC50)单用或联用,于不同时间(24h,36h,48h)的条件下处理人肺腺癌A549细胞,以CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;(3)应用流式细胞仪来检测人肺腺癌A549细胞的凋亡率分布;(4)Western blot检测Bax及Bcl-2蛋白的表达情况。结果:1.运用CCK-8法检测不同浓度的白杨素以及洛铂作用于人肺腺癌A549细胞,研究结果发现,随着白杨素以及洛铂药物浓度的升高,人肺腺癌A549细胞的细胞增殖抑制率亦随之逐渐升高,呈剂量依赖性(P<0.05),具有统计学差异。2.运用CCK-8法检测各组(对照组,白杨素组,洛铂组,白杨素联合洛铂组)药物作用于人肺腺癌A549细胞,发现白杨素联合洛铂组作用于人肺腺癌A549细胞时,其增殖抑制率明显优于对照组以及单药组(P<0.05),并且呈时间依赖性(P<0.05),其差异具有统计学意义。3.应用流式细胞仪检测各组(对照组,白杨素组,洛铂组,白杨素联合洛铂组)人肺腺癌A549细胞凋亡率,并进行比较,发现白杨素联合洛铂组作用于人肺腺癌A549细胞的总凋亡率(24.06±1.502%)明显多于白杨素组的总凋亡率(14.98±7.237%)和洛铂组的总凋亡率(11.743±3.843%)(P<0.05),其差异具有统计学意义。4.Western Blot法检测示:与对照组相对比,当白杨素(42.276μmol/L)组在作用于人肺腺癌A549细胞后,可引起Bax(2.216±0.03)蛋白相对表达量的上调以及Bcl-2(1.071±0.007)蛋白相对表达量的下调;洛铂(18.596μmol/L)组作用人肺腺癌A549细胞后,引起Bax(2.028±0.025)蛋白相对表达量的上调,Bcl-2(0.892±0.011)蛋白相对表达量的下调。而相较于对照组和单药组(白杨素组,洛铂组),两药联合组(白杨素组联合洛铂组)作用于人肺腺癌A549细胞后,引起Bax(2.545±0.166)蛋白相对表达量的上调以及Bcl-2(0.469±0.013)蛋白相对表达量的下调,相对表达量水平有显著差异(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:1.白杨素及洛铂分别在(5~160μmol/L以及2.5~80μmol/L)的浓度范围内,能够抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,并且两药联合要明显优于单药。2.虽然白杨素及洛铂均能诱导人肺腺癌A549细胞凋亡,但是两药联合诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡能力明显优于单药。3.白杨素联合洛铂作用于人肺腺癌A549细胞的增殖、凋亡的影响与其下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白的表达具有相关性。
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