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目的验证一种新型双特异性T细胞募集抗体Y150对CD38以及CD3的双靶向能力,以及其介导T细胞对多发性骨髓瘤（MM）细胞的杀伤能力,并探讨其相关的作用机制。方法（1）首先,在体外验证Y150的功能。在细胞水平上通过流式细胞术验证Y150的Fab端同时靶向CD38以及CD3的能力。将DARZALEX、MOR202 anolog和CD3isotype作为Y150的对照抗体,确定该抗体的作用机制。通过从健康志愿者的PBMCs中提取NK细胞,将NK细胞、MM细胞与抗体共培养,验证抗体有无介导抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）的能力。通过从健康志愿者的血液中提取补体,将补体、MM细胞与抗体共培养,验证抗体有无介导补体依赖的细胞毒作用（CDC）的能力。通过从PBMCs中提取单核细胞,将单核细胞诱导形成巨噬细胞,然后将巨噬细胞、MM细胞与抗体共培养,验证抗体有无介导抗体依赖的细胞介导的吞噬作用（ADCP）的能力。将MM细胞、Y150与交联蛋白共培养,验证抗体有无介导细胞程序性死亡作用（PCD）的能力。（2）其次,在体外验证Y150的抗肿瘤作用。通过流式细胞术检测人源性细胞系NCI-H929、Daudi、U266B1、RPMI-8226-Luc、HEK 293细胞表面CD38的表达水平。从健康志愿者的PBMCs中提取T细胞,将T细胞分别与各细胞系及Y150共培养,检测Y150介导T细胞对不同CD38表达水平的细胞系的杀伤能力。然后进一步分析在上述培养体系中,Y150对T细胞的活化以及对T细胞分泌IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ等细胞因子的影响。为了探究Y150对PBMCs中免疫细胞的毒性,通过流式细胞术检测了2名健康志愿者的PBMCs中T细胞、NK细胞、B细胞和单核细胞表面的CD38的表达水平。然后将Y150与人PBMCs共孵育,检测Y150介导T细胞对各免疫细胞的杀伤能力。将Y150与人PBMCs和Daudi细胞共孵育,检测各免疫细胞的增殖水平。（3）最后,在免疫缺陷的NPG小鼠体内验证Y150对MM的抗肿瘤效果。先在NPG小鼠尾静脉注射人PBMC重建人免疫系统。26天后在皮下接种MM细胞NCI-H929建立小鼠异种移植模型,31天后将体内构建人免疫系统的64只小鼠用玻璃毛细吸管从眼球取血,流式检测血细胞中流式检测血细胞中人CD3阳性鼠CD45阴性细胞的比例,血细胞中该细胞比例占比大于1%即认为人免疫系统构建成功,剔除没有构建成功的小鼠。将小鼠分为生理盐水组,Y150 5mg/kg组、Y150 1mg/kg组、Y1500.2mg/kg组、CD3 isotype 1mg/kg组,Y150 1mg/kg N/A PBMC组,隔一天给药一次,共给药5次。监测小鼠体重以及肿瘤体积,41天后处死小鼠取瘤,取部分瘤组织通过免疫组化检测CD3、CD4和CD8的表达。部分瘤组织消化成单细胞悬液,分别检测该细胞悬液以及小鼠外周血细胞中人CD4+T细胞、人CD8+T细胞的比例、活化、增殖以及细胞因子分泌程度。结果（1）Y150的Fab端可以同时靶向细胞表面的CD3和CD38分子,经过改造的Fc端无法介导ADCC、ADCP、CDC、PCD效应。DARZALEX和MOR202 anolog无法同时靶向细胞表面的CD3和CD38分子,并且有ADCC、ADCP、CDC和PCD效应,CD3 isotype无ADCC、ADCP、CDC和PCD作用。（2）Daudi、NCI-H929和RPMI-8226-Luc细胞具有高水平的CD38表达。U266B1细胞很少表达CD38,HEK293细胞几乎不表达CD38。Y150可以有效介导T细胞对高表达CD38的MM细胞的杀伤。在与高表达CD38的MM细胞共孵育时,Y150可诱导T细胞显著活化（p<0.001）,促进其分泌IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ等细胞因子。在分别与两个健康供体的PBMCs共孵育后,结果均显示Y150对单核细胞有较强的细胞毒性,对NK细胞和B细胞有轻微的细胞毒性,对T细胞无细胞毒性。在与PBMCs和Daudi共孵育3天后,Y150刺激T细胞和B细胞大量增殖,NK细胞无明显变化。共孵育6天后,Y150刺激T细胞大量增殖,而对B细胞和NK细胞均无刺激增殖效果,DARZALEX和MOR202 analog刺激NK细胞大量增殖。（3）NPG小鼠模型显示Y150 5mg/kg组肿瘤完全消失,Y150 1mg/kg组肿瘤明显减小,生理盐水组、CD3 isotype 1mg/kg组以及Y150 1mg/kg N/A PBMC组肿瘤大小无明显变化。小鼠外周血和肿瘤组织周围有大量活化的T细胞浸润,并且分泌大量细胞因子。结论Y150在体内和体外实验中均可以刺激T细胞活化、增殖、释放细胞因子,介导T细胞靶向杀伤高表达CD38的MM细胞,且对其他免疫细胞无明显影响。Y150在治疗多发性骨髓瘤和降低微小残留病灶（MRD）检测范围以下的肿瘤负荷方面可能具有广阔的应用前景。