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植物生长素作为最早被发现的一类植物激素,在植物生长发育的各个阶段都发挥着重要的调节作用。目前,植物生长素的生物合成、运输、降解及信号转导机制方面的研究已经取得了很大进展。其中,生长素受体TIR1和转录抑制因子Aux/IAAs、特别是这两者组成的共受体对生长素具有较高的特异亲和性,这为TIR1和Aux/IAAs在生长素的分离纯化方面的应用提供了启示,为此,获得大量的活性TIR1和Aux/IAAs蛋白是重要基础。因此,本文以野生型拟南芥为材料,通过RT-PCR获得AtIAA7和AtTIRl序列,以带有GST纯化标签的pGEX-KG和pIEx-3载体为基本骨架,构建了原核表达载体pGEX-KG-IAA7、pGEX-KG-TIR1和真核表达载体pIEx-3-IAA7、pIEx-3-TIR1。将原核表达载体分别转化大肠杆菌表达菌株Rosseta(DE3)、BL21(DE3)、Tuner(DE3),优化了重组蛋白的表达和纯化条件。结果表明：GST-IAA7蛋白在Rosset中表达较好,最佳诱导条件为25℃下04 mmol/L的IPTG诱导4h,在此条件下可收获1.6%(鲜重)的重组蛋白；GST-TIR1蛋白则在Ross et菌株中、以0.4 mmol/L浓度的IPTG、于25℃诱导时表达最好,但GST-TIR1重组蛋白以包涵体形式存在。然后,利用GST亲和树脂对GST-IAA7进行纯化,在纯化过程中加入苯甲基磺酰氟(PMSF)可显著增强GST-IAA7重组蛋白在体外的稳定性；最后用凝血酶切除GST标签获得了单一的IAA7蛋白。此外,在建立和优化黑腹果蝇S2胚胎细胞的培养条件基础上,将真核表达载体pIEx-3-IAA7转染S2细胞并筛选稳定表达IAA7的细胞系,结果表明：胎牛血清对S2细胞短期内生长的影响并不大；将pIEx-3-IAA7与筛选质粒pCoHygro共转染S2果蝇胚胎细胞,经潮霉素B筛选,获得能够表达IAA7重组蛋白的稳定细胞系；并用GST亲和树脂从细胞培养液中成功分离和纯化到IAA7重组蛋白。