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研究背景 哮喘（Asthma）是由多种细胞参与的气道慢性炎症性疾病，伴有黏液高分泌、气道高反应性和可逆性气流受限。目前普遍认为哮喘患者存在Th2占优势的Th1／Th2失平衡，而γ-干扰素（IFN-γ）、白介素（IL）-4分别是Th1、Th2型细胞主要的细胞因子，在哮喘的气道慢性炎症中起重要作用。近几十年来，全世界尤其在西方发达国家，变态反应性疾病的发病率呈逐年增加的趋势，原因目前还不是很清楚。1997年，Shirakawa等发现结核菌素的迟发性反应与变态反应性疾病的发病率呈明显的负相关，William等也提出西方国家哮喘发病率的上升与环境中某些能增强机体Th1免疫应答的病原体感染（如结核杆菌、风疹病毒等）机会减少有关，故而提出了“卫生学说”。减毒活菌卡介苗（BCG）是一个很强的Th1型细胞诱导剂，许多研究已经表明BCG可以抑制哮喘患者或哮喘小鼠气道炎症浸润和气道高反应性（airway hyperresponsiveness，AHR），纠正了哮喘的Th2反应失衡，促使其向Th1型反应发展。早期接种BCG是否能够预防哮喘的发生?目前这方面的研究很少，国外仅少量研究表明早期接种BCG后可以促使新生儿以及新生小鼠的免疫系统向Th1反应发展，部分抑制了后期哮喘的气道炎症，但是关于早期更小剂量BCG（103CFU）接种是否可以预防后期哮喘小鼠的发生，目前国内外未见报道。 研究目的 在我们成熟的哮喘模型基础上，给幼鼠不同剂量多次接种BCG，待长大后诱发哮喘，观察：①早期接种卡介苗是否能够抑制甚至预防哮喘气道炎症，②早期接种卡介苗是否能够促进免疫系统的发育，纠正Th1／Th2失衡；③小剂量BCG接种是否能取得与大剂量接种相同的预防效果。<sub>嘟加介次掌临床医学硕士学位论文研究方法选择24小时刚出生33只C57BL/6幼鼠，随机分为5组:阴性对照组、八组，7只)，致敏攻击组（B组，7只）和BCG皮下接种组:低剂量接种组 (〔组，7只，BC（;10，CFU/只）:中剂量接种组（D组，5只，BCG10‘CFU/只）:高剂量接种组(E组，了只，BC（，l（）s CFU/只），分别于第0周、l周、2周和3周共4次皮卜接种l弓C(;，而A、B组则皮下注射生理敖水对照:待6周后，A组以生理欲水致敏激发，余组以卵白蛋白（OVA）致敏激发，在最后一次抗原激发后48小时测定B川一F炎症细胞，组织病理观察肺组织炎症，行肺组织逆转录一聚合酶链方法（RT一既R）测定Th:汀hZ细胞因子IFN一Y、IL一4 mRNA水平。研究结果:、沉G接种干预后对哮喘小鼠气道炎症的影响泣.11汇G接种干预后对BALF中细胞学改变 与A组相比，B组及卡介苗各组能显著增加抗原攻击后引起的BALF中白细胞和EoS总数（表l）。与B组相比，卡介苗各组不能显著降低I3ALF中白细胞总数，但是均显著降低了FoS总数及其百分比（P<0.01）。1，2污CG接种干预后对肺组织改变 气道炎症浸润:A组能染色气道上皮完整，周围少许细胞，血管周围见少量细胞浸润。B组气道上皮增生肥大，上皮不完整，周围见大量炎症细胞浸润。BCG各组气道L皮较完整，周围炎症细胞浸润明显减少，血管周围细胞也显著减少。2.BC〔;接种干预后对肺组织Il.一4八FN一Y mRNA平衡的改变 对于I厂N一Y mRNA的A值比来说:与A组比较，B组表达降低，而C组、D组和E组表达增高，但未达到显著性差异（P>0.05），与B组相比，BCG各组表达均显著性增加（P<0.01）; 对于JJ二一4mRNA的A值比来说:A组肺组织未见到其表达，其余各组均明显表达;一与B组相比，C组、D组和E组表达均降低，但未达到显著性差异(P>0.（、5）: 以11厂4m尺NA与JFN一Y。尺NA的比值（几一4/IFN一Y mRNA）表示Th:/ThZ细胞因子mI州A的平衡，发现与B组相比，BCG各组均有不同程度的降低，但只有C组有显著性差异（I，<0.05）。 匆加声，认驴临床医学硕」竺燮丝结论l、接种BC(;可明显抑制哮喘小鼠气道炎症BAI，F中而S水平，抑制炎症细胞的气道浸润。2、接种BCG可以增强新生小鼠的免疫功能，小剂量BCG接种诱导其向Th.型反应发展，大剂量BCG接种促进了’rh!/Th，混合型T反应。3、新生小鼠多次接种小剂量BCG可以部分预防后期哮喘的发生，为哮喘的预防 提供了理论基础。