用沙棘籽渣制备活性肽的研究

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沙棘,又名醋柳,属胡颓子科沙棘属的一种落叶性灌木,在我国主要分布于干旱地带,山西是中国沙棘产量最大的省,省内沙棘加工企业繁多,主要产品集中在沙棘汁的压榨,沙棘油的提取方面。企业在加工沙棘果的过程中产出大量的沙棘籽渣,沙棘籽中含有30%左右的粗蛋白,而这部分渣子大部分被作为饲料或弃去。本文章以废弃的沙棘籽渣为原料,研究酶解法制备抗菌、抗氧化和促进生长发育功能肽。本课题主要研究内容及进展如下:1、研究沙棘籽渣的前处理工艺。研究沙棘籽渣经浸泡后,用复合酶(纤维素酶,植酸酶,单宁酶)处理后,蛋白的溶出增加率。结果表明在复合酶的水解作用下,多肽得率明显提高。2、研究沙棘籽渣水解多肽的工艺。分析胃蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶B等几种蛋白酶对经过前处理后的沙棘籽渣的水解效果;以多肽得率为指标确定了各种蛋白酶的最佳水解条件。3、研究不同酶解多肽的体外抗氧化作用。采用体外与体内抗氧化试验比较不同多肽的抗氧化效果。研究表明,在胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶三种酶解多肽中,酸性蛋白酶水解多肽的体外抗氧化效果最佳。超滤分离确定此多肽的最佳抗氧化分子量在500~2000Da.。该多肽浓度在20mg/ml时对羟自由基的清除率达到91.35%,对超氧阴离子自由基的清除率达到64.33%,总抗氧化能力达到0.906。体内抗氧化试验也证明了酸性蛋白酶水解多肽具有良好的抗氧化作用。4、研究沙棘籽酶解多肽体外抑菌效果。试验采用抑菌圈培养法考察不同蛋白酶水解多肽对的抑制作用。试验表明,中性蛋白酶B酶解多肽对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等肠道细菌均有抑制作用,抑菌圈分别达到了3.3mm,4.2mmm,2.8mm,明显优于其它酶解多肽。500~2000Da的多肽与多肽混合液对这几种致病菌的抑制作用相近,其他各段多肽抑菌效果较差。5、研究沙棘籽渣酶解多肽促进生长发育的作用。研究发现,喂食胰蛋白酶水解多肽的乳鼠哺育的幼鼠经过28天的哺育喂养,平均体重和身长与基础组相比均有显著增加,特别是14d之前幼鼠的身长、体重及饲料利用率促进作用良好;门齿萌出时间、长毛时间与开眼时间等指标也比基础组显著提前;神经系统发育相对于基础组也有显著提前,说明该多肽可能具有促进生长发育作用。
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