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目的: 肺癌严重危害人类健康并且缺乏良好的治疗效果,目前化疗仍然是肺癌治疗的常见方法之一,而顺铂是常见的化疗药物之一,在化疗的过程中对于顺铂的耐药是影响肺癌治疗效果的重要原因之一,但是顺铂耐药的机制并不明确,近期的研究表明,Wnt/β-catenin信号通路及自噬过程均与肺癌的发生与发展有关。本实验研究通过建立肺癌A549耐药细胞株A549/DDP,通过检测各组耐药肺癌A549细胞自噬水平及β-catenin的表达改变以了解Wnt/β-catenin通路与自噬途径在肺癌A549细胞耐药形成过程中的关系。 方法: 采用逐渐增加顺铂浓度的方法建立耐顺铂肺癌细胞株A549/DDP。MTT试验检测各组耐药水平的细胞增殖率来评价造模情况,MDC实验检测各组细胞的自噬水平。实时荧光定量PCR测定不同耐药水平A549细胞LC3Ⅱ、β-catenin的RNA表达改变。Western Blotting测定不同耐药水平A549细胞LC3Ⅱ、β-catenin的蛋白质表达改变。 结果: (1)成功建立了不同浓度的耐药细胞株A549/DDP。与对照组比较,不同浓度顺铂都能抑制不同耐药水平A549细胞生长,耐药水平越高,细胞存活率越高(P<0.05)。 (2) MDC实验显示随着耐药水平的提高,细胞内自噬泡的数量也跟着增多。 (3) RT-PCR和Western结果显示LC3Ⅱ、β-catenin的RNA和蛋白表达较低水平耐药明显增高(P<0.05)。 结论: 我们的研究表明肺癌A549顺铂耐药细胞系中Wnt/β-catenin通路的激活与自噬水平的提高在其耐药性的形成发挥了重要的作用,为降低肺癌细胞对顺铂的耐药性提供了一些新的思路。