板栗壳亚临界水提取物的多酚组成与抗氧化及消化酶抑制活性研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongqinshuling
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板栗壳中含有丰富的多酚类物质,如果能充分利用,可获得良好的经济效益和生态效益。目前,板栗壳中多酚物质的提取主要使用传统的固-液提取法,提取时间长、效率低,有机试剂的大量使用存在潜在的环境污染和健康危害。亚临界水提取技术作为新兴的、绿色无污染提取方法,近年来已经被广泛应用于天然产物活性成分的提取,但是尚未有应用该技术提取板栗壳多酚物质的相关报道。为评估亚临界水提取技术应用于板栗壳多酚成分提取的可行性,本论文分析了板栗壳亚临界水提取物的多酚成分组成、抗氧化活性及消化酶抑制活性随提取温度改变的变化规律,并与丙酮回流提取(AE)、甲醇回流提取(ME)、丙酮超声辅助提取(AUE)、甲醇超声辅助提取(MUE)以及传统热水回流提取(WE)方法进行对比,主要研究结果如下:(1)板栗壳亚临界水提取物中的多酚成分受提取温度影响显著。板栗壳提取物的干物质得率和总酚含量均随亚临界水温度的升高而显著增加,并在220℃时达到峰值,分别为14.82±0.14%和746.71±3.35mg GAE/g,远高于AE、AUE、ME、MUE以及WE提取法,并且具有提取时间更短、操作简单及能量消耗低等优点。(2)基于高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术,构建了板栗壳提取物中表没食子儿茶素、原儿茶醛、阿魏酸等18种多酚成分的定性及定量检测方法。结果发现,亚临界水温度在120℃至160℃范围内,多酚成分含量和种类随着温度的升高均呈现升高趋势,超过180℃后,随着温度的升高,多酚成分含量和种类出现下降趋势,可能是随着提取温度升高,水的扩散率增加,有利于多酚类物质的扩散和溶解。但是当温度过高时,提取物中某些热不稳定性多酚成分会发生降解。结果说明,亚临界水提取技术对板栗壳多酚的总提取率显著高于传统水提、有机溶剂提取以及有机溶剂超声辅助提取,但是提取物的组成受到提取温度的显著影响。(3)板栗壳不同温度的亚临界水提取物对ABTS、DPPH自由基的清除活性和FRAP铁离子的还原能力,均显著高于传统提取方法所得提取物。但是,亚临界水提取物的抗氧化能力受提取温度的影响显著,当提取温度逐渐升高时,抗氧化能力先降低然后增强,在140℃时最低,在220℃时最高,220℃时提取物ABTS、DPPH和FRAP 抗氧化活性当量分别为 4.83±0.05,4.15±0.01,30.57±0.17 mM Trolox/g。板栗壳提取物的抗氧化能力的强弱与总酚含量显著相关。(4)板栗壳不同温度的亚临界水提取物均具有抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性,且抑制效果显著高于传统提取方法所得提取物。120℃亚临界水提取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制效果最好,IC50值分别为0.012和0.017 mg/mL,抑制活性强于阿卡波糖,其抑制作用均存在显著的量效关系,且抑制类型均为竞争性、可逆性抑制。
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