【摘 要】
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目的: 探索TGF-β1/Smad信号通路在早产儿视网膜病变(Retinopathy of prematurity,ROP)一期血管生长延迟中的变化及作用,为早期干预ROP提供新思路. 方法: 1、建立大
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目的: 探索TGF-β1/Smad信号通路在早产儿视网膜病变(Retinopathy of prematurity,ROP)一期血管生长延迟中的变化及作用,为早期干预ROP提供新思路. 方法: 1、建立大鼠50/10氧诱导视网膜病变(Oxygen-induced retinopathy,OIR)模型,应用免疫组化法比较OIR组与对照组第二天(D2)、D4、D6、D10及D14的视网膜中TGF-β1的表达量和分布差异; 2、体外培养人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),对实验组进行高氧/低氧循环刺激,观察其形态学变化,并进行细胞功能学检测(划痕实验及Transwell实验);分别提取RNA进行RT-qPCR检测TGF-β1的mRNA相对表达量,Western blotting检测细胞总蛋白中pSmad2/3的表达量. 结果: 1、视网膜免疫组化结果显示,在D2和D4,OIR组的TGF-β1表达量均高于对照组;在D6,两组的表达量差异不明显;D10和D14,OIR组的表达量始终低于常氧对照组.且TGF-β1的表达主要集中于视网膜浅层血管区,OIR组中深层血管区未见其表达; 2、高氧/低氧循环刺激HUVEC后,细胞形态发生变化,增殖、迁移能力减弱; 3、RT-qPCR实验中,TGF-β1在刺激2个及3个循环后mRNA相对表达量呈现实验组高于对照组的趋势,而刺激4个循环后,实验组表达量低于对照组; 4、Western blotting结果显示,实验组pSmad2/3的表达量明显低于对照组,具有统计学差异. 结论: 在大鼠50/10OIR模型和高氧/低氧HUVEC模型中,TGF-β1的表达量均呈先升高后降低的变化趋势;在体外刺激细胞模型中,下游的pSmad2/3明显降低,且细胞增殖迁移能力减弱,表明TGF-β1/Smad2/3信号通路的表达降低可能与血管生成减少有关,并参与ROP一期血管生长抑制.
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