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背景斑点热为一种常见的蜱传疾病,该病由斑点热群立克次体（Spotted fever group rickettsia,SFGR）引起的,该病原体主要是通过蜱虫叮咬而感染人。近年来,我国学者在蜱中陆续发现新发立克次体,如在我国新疆地区的图兰扇头蜱中发现Rickettsia massiliae,吉林延边地区的长角血蜱中检测到Candidatus Rickettsia longicornii。我国尚无上述两种立克次体的分离株,且在我国其他地区尚未有关于这两种立克次体的报道,全国尚无相关病例出现。立克次体的传播与媒介蜱紧密相关,有研究证实立克次体能在媒介蜱不同发育阶段传播并维持致病性。媒介蜱体内除了立克次体外的其他微生物亦会影响蜱虫,如柯克斯氏体（Coxiella）与多数蜱虫成专性共生关系,已有研究证实通过抗生素干预降低Coxiella载量,可使美洲花蜱及长角血蜱的繁殖能力降低,也可影响微小扇头蜱幼蜱发育为成蜱。然而尚无报道,四环素干预是否可通过影响内生菌（如Coxiella）或其他微生物构成,进而影响致病性立克次体在蜱内传播。目的1.对我国部分地区的蜱虫进行新发立克次体检测,分离新发立克次体,为后续致病性和人群感染的调查研究奠定基础,为该地区提供本底数据2.以媒介蜱为切入点,采用四环素干预,评价干预手段对新发立克次体及柯克斯氏体的影响,阐述两者联系,以期为蜱传立克次体病及虫媒的防控提供新思路。方法采集我国部分地区蜱虫,将饱血母蜱进行人工饲养,运用巢式PCR方法对游离蜱虫、母蜱及卵进行斑点热立克次体检测,经测序及序列分析,获得蜱虫感染情况,并对新发立克次体进行分离;基于已建立的新发立克次体阳性及阴性森林革蜱种群,从幼蜱开始叮咬正常组、对照组、抗生素处理组Bal B/C小鼠,荧光定量PCR检测不同组中柯克斯氏体和新发立克次体的载量,用2-ΔΔCt方法计算不同组相对于对照组的差异倍数,运用统计学方法检验差异是否有统计学意义,描述经期传播趋势及抗生素对这两种菌的影响;再通过16S r RNA V3-V4高变区扩增子测序,描述不同组媒介蜱中微生物组的构成,阐述抗生素干预对媒介蜱微生物组的影响。结果1.第一部分结果微小扇头蜱感染Candidatus Rickettsia longicornii,猛突血蜱感染Rickettsia massiliae,两种母蜱及对应的卵均呈检测阳性,两种蜱虫中立克次体检出率分别为60%（12/20）、50%（5/10）,青海血蜱、铃头血蜱及森林革蜱分别感染Uncultured Rickettsia sp.、Rickettsia japonica、Rickettsia raoultii,检出率分别为20.8%（5/24）、60%（3/5）、81%（13/16）;分别从微小扇头蜱的卵、猛突血蜱若蜱中分离到Candidatus R.longicornii、R.massiliae。2.第二部分结果获得非抗生素干预组4个虫态（卵、幼蜱、若蜱、成蜱）中新发立克次体Rickettsia raoultii、Coxiella的相对载量。立克次体阳性种群中,以卵为参考,幼蜱、若蜱、雌性及雄性成蜱内R.raoultii平均变化倍数先降低后升高,在两个种群中,经期阶段Coxiella平均变化倍数均升高,而在若蜱阶段达到最高,阳性种群中成蜱内及阴性种群中幼蜱与若蜱内Coxiella平均变化倍数升高,差异具有统计学意义。在阳性种群中,各干预组相对于对照组,R.raoultii载量变化不明显,而在幼蜱与若蜱两阶段均为干预组,蜕皮为成蜱一周时,Coxiella载量平均变化倍数升高（4.22（雌性）（P<0.05）、15.18（雄性））,一个月后,反而降低（0.49（雌性）、0.11（雄性））;在阴性种群中,相对于对照组,两阶段均为干预组（蜕皮为雌性成蜱一周）Coxiella载量平均变化倍数升高（2.85）（P<0.05）,一个月后,其平均变化倍数降低（0.83）;立克次体阳性种群中,两阶段均为干预组及对照组若蜱蜕皮为成蜱一个月相对一周时,R.raoultii平均变化倍数均降低,持续干预组成蜱及对照组雄性成蜱中R.raoultii平均变化倍数降低,差异具有统计学意义,两阶段均为干预组蜕皮为成蜱一个月相对于一周时,Coxiella载量降低（0.91（雌性）、0.06（雄性）（P<0.05））,而两阶段均为对照组的Coxiella载量升高（7.94（雌性）（P<0.05）、8.75（雄性）（P<0.05））。在阴性种群中,若蜱蜕皮为雌性成蜱一个月相对于一周,Coxiella载量平均变化倍数在持续干预组中为1.37,在对照组中升高,为4.94（P<0.05）。通过物种注释,发现在两种群中的非干预组内雄性成蜱物种丰富度及多样性均高于雌性成蜱。在阳性种群中,两阶段均为干预组相对于对照组（蜕皮为雌、雄性成蜱一周）物种丰富度升高,而蜕皮为成蜱一个月后干预组物种丰富度反而降低了;在两阶段持续干预组中,若蜱蜕皮为成蜱一个月相对于一周时物种丰度降低,而在持续对照组中物种丰度升高。从菌属水平上分析,可得阳性种群中持续干预组若蜱蜕皮为成蜱（雌、雄）一周时,Coxiella属丰度高于对照组,而Rickettsia属丰度低于对照组,但在一个月时,Coxiella属丰度低于对照组,Rickettsia属丰度高于对照组。结论1.从四川地区微小扇头蜱及云南地区猛突血蜱检测并分离到的新发立克次体分别为Candidatus Rickettsia longicornii和Rickettsia massiliae,该两种病原体能经卵传播,使其能在蜱虫中长期存在,对人类健康造成较大威胁;2.在立克次体阳性种群中,四环素在蜱虫饱血后并完成蜕皮为下一虫态的某段时间内可能起到刺激Coxiella生长或其他菌种的作用,但在之后某段时间可能抑制Coxiella生长,经期阶段该四环素对R.raoultii无明显影响;3.Coxiella与R.raoultii在成蜱中可能存在拮抗的生存关系。