超微粉化对生脉散抗心肌缺血大鼠心肌重塑的影响

来源 :湖南中医药大学 湖南省中医药研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyan123
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目的:探讨超微粉化对生脉散主要成份及其抗缺血心肌重塑作用的影响,并从金属基质酶和抑制剂角度阐明其抗心肌重塑的作用机理。 方法: 1.采用气流粉碎方式制备微米级超微生脉散,采用高效液相色谱法检测生脉散有效成份人参皂甙Rgl和五味子醇甲的溶出率。 2.采用左冠状动脉结扎后再关闭胸腔复制长期心肌缺血模型。 3.雄性Wastar大鼠,随机分为假手术组、模型组、传统生脉散组、全量超微生脉散细,1/2量超微生脉散细和1/4量超微生脉散组,给予不同处理。分别于术后1天和14天处死,检测其心肌缺血和心肌重塑情况。 4.wastar大鼠随机分为假手术组、模型组、传统生脉散纽和1/2量超微生脉组,给予不同处理,分别于术后7、14天处死动物,采月免疫组织化学法和RT-PER检测缺血心肌MMP-2和TIMP-1蛋白和基因表达情况。 结果: 1.在色谱柱为C18,流动相为乙腈:水(70:30),流速为1.0ml/min,柱温为30℃,检测波长为203nm条件下,能很好地检测人参皂甙Rgl和五味子醇甲,分别在0.117 3~5.865ug和0.02 34~1.17ug范围内呈线性关系。 2.按传统煎法生脉散的人参苷Rlg和五味子醇甲溶出率分别为(15.33±1.58%)和(5.16%±1.08%),超微粉化后两者溶出率分别为(46.15±2.36%)和(18.3%±1.76%),两种饮片溶出率差异有显著性,P<0.01。 3.结扎左冠状动脉可造成大鼠长期心肌缺血,但动物死亡率增加,生脉散能改善心肌缺血;全量超微生脉散、1/2量超微生脉散抗心肌缺血与传统生脉散作用相当,P>0.05;1/4超微生脉散组作用不明显。 4.长期左心室缺血可引起左室单位质量增加,但对右室单位质量影响不明显。传统生脉散能阻止左室单位质量增加,超微粉化生脉散对左室单位质量均有不同程度的作用,各组左室单位质量为(3.20±0.58),(3.11±0.49),(3.24±0.55)和(3.63±0.57)mg/g,全量和1/2量超微生脉散与传统生脉散比较差异无显著性,P>0.05;1/4量超微生脉散与传统生脉散差异有显著性,P<0.05。 5.长期心肌缺血可上调MMP-2基因和蛋白表达水平,抑制TIMP-1的表达,生脉散能拮抗此病理生理过程。传统生脉散组MMP-2阳性细胞和基因表达水平在7、14天分别为(19.05±3.31),(14.31±3.58)个/mm<2>和(0.779±0.146)、(0.70±0.132);1/2量超微生脉组分别为(19.17±2.89)、(15.18±4.13)个/mm<2>和(0.78 3±0.134)、(0.711±0.151)。传统生脉组TIMP-1阳性细胞和基因表达水平分别为(5.83±1.05)、(5.96±1.13)个/mm<2>和(0.513±0.115)、(0.639±0.153),1/2量超微生脉散组分别为(5.88±1.10)、(6.03±1.21)个/mm<2>和(0.509±0.109)、(0.628±0.148)。传统生脉组方1/2超微生脉组对MMP-2、TlM-1的影响差异无显著性,P>0.05,但与模型组差异均有显著性,P<0.05。 结论: 1.超微粉化有利于生脉散有效成份溶出。 2.超微粉化能提高生脉散抗心肌缺血和心肌重塑的作用,1/2量与全量传统饮片相当。 3.长期心肌缺血通过影响MMP-2,TIMP-1的表达而引起心肌重塑,生脉散能调节缺血后MMP-2、TMP—1的异常,延缓心肌重塑。
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