【摘 要】
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化学发光是检测生物体液中重要分析物的最灵敏方法之一。化学发光是一种发光现象,由发光体与其共反应物之间的化学反应产生,而无需使用外部光源。化学发光最常见的优点是快速、廉价、高灵敏度、高选择性、宽线性范围和可控发射。自1928年以来,大多数报道的化学发光系统使用过氧化氢(H202)和溶解氧作为鲁米诺和光泽精化学发光的共反应剂。H202和溶解氧可以与多种过渡金属阳离子相互作用,导致选择性和稳定性差。因此
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化学发光是检测生物体液中重要分析物的最灵敏方法之一。化学发光是一种发光现象,由发光体与其共反应物之间的化学反应产生,而无需使用外部光源。化学发光最常见的优点是快速、廉价、高灵敏度、高选择性、宽线性范围和可控发射。自1928年以来,大多数报道的化学发光系统使用过氧化氢(H202)和溶解氧作为鲁米诺和光泽精化学发光的共反应剂。H202和溶解氧可以与多种过渡金属阳离子相互作用,导致选择性和稳定性差。因此,迫切需要为不同类型的化学发光发光体发展具有优异选择性和稳定性的新型共反应剂,以扩展其分析应用范围。在本论文中,我们主要发展具有不同检测应用的新型化学发光系统。我们设计发展了不同种类的发光体(鲁米诺和光泽精)的新共反应剂,以构建新的化学发光系统。我们还合成了一种新的、选择性好且结构简单的电化学探针,用于测定人血浆中的生物硫醇(半胱氨酸、谷胱甘肽和同型半胱氨酸)。主要成果如下:1.首次报道了鲁米诺-硅钨酸化学发光系统,鲁米诺-硅钨酸系统比鲁米诺-H2O2系统的化学发光强65倍。这种化学发光增强归因于硅钨酸(STA)分解产生的三氧化钨(强氧化剂)。尿酸可以猝灭化学发光强度,因此,新的化学发光系统被用于灵敏的尿酸测定,检测限为0.75nM。人尿样回收率在99.6-102.3%之间。此外,该系统测定硅钨酸的检测限为0.24μM。2.为了开发具有众多传感特性的高灵敏和选择性的化学发光平台,我们提出了适用于各种传感环境和生物学应用的光泽精-邻苯三酚化学发光系统。相较于H2O2,邻苯三酚可以使光泽精化学发光强度提高190倍。值得注意的是,钴离子可以与邻苯三酚选择性地相互作用,并减慢邻苯三酚的氧化。此外,在硼酸化缓冲溶液中,邻苯三酚也可以作为酪氨酸酶的底物。因此,酪氨酸酶和钴离子都可通过减少邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子自由基的释放来抑制光泽精-邻苯三酚化学发光。基于上述现象,我们建立了邻苯三酚(检测限0.94 μM)、光泽精(检测限0.42 μM)、钴离子(检测限68 nM)和酪氨酸(检测限1.8 μg/mL)的检测方法。此外,已建立的系统已分别用于测定咖啡、湖水和人血浆中的邻苯三酚、Co2+和酪氨酸酶。3.我们首次报道了一种新颖简单的电化学探针,用于选择性检测生物硫醇。该探针使用2,4-二硝基苯磺酰基(DNBS)作为生物硫醇检测的有效和选择性识别部分。通过2,4-二硝基苯磺酰氯(DNBS-C1)和对氨基苯酚之间的一步反应成功制备了电化学探针。生物硫醇可以在10分钟内通过芳香族亲核取代反应选择性地裂解DNBS部分,从而释放出对氨基苯酚这种高电化学活性的分子,在低电压即可轻松检测到该分子。该探针已用于半胱氨酸、谷胱甘肽和同型半胱氨酸的测定,其检测限分别为1.50,3.48和4.67 μM。血浆样品中总生物硫醇的测定的回收率在95.4-98.7%之间。
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