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红树莓具有较高的药用价值和保健作用。红树莓籽作为红树莓加工的副产物,具有开发利用的前景及价值。本文研究3种提取方法提取红树莓籽油,确定红树莓籽油的最佳提取方法,探究红树莓籽油贮藏稳定性及红树莓籽油体外抗氧化、降血脂活性,得到的主要结论如下:1.采用单因素试验及L9(34)正交试验优化索氏提取、高剪切-超声提取法提取红树莓籽油的工艺参数,并与优化后超声提取法对比。结果表明,索氏提取法最佳提取工艺参数为:提取溶剂为正己烷,红树莓籽粉碎度为100目,液料比15 mL/g,提取时间1.0 h,提取温度80℃,在此条件下,红树莓籽油得率为19.96±0.52 g/100g。超声提取法最佳提取工艺参数为:提取溶剂为正己烷,红树莓籽粉碎度为80目,液料比11 mL/g,超声时间25 min,超声温度30℃,超声功率120 W,在此条件下,红树莓籽油得率为20.34±0.32 g/100g。高剪切-超声提取法最佳提取工艺参数为:提取溶剂为正己烷,红树莓籽粉碎度为100目,液料比10mL/g,在超声波中间歇性的高剪切(启动高剪切10 s,暂停20 s为1个周期)超声时间15 min,超声温度40℃,超声功率270 W,高剪切转速15000 r/min,在此条件下,红树莓籽油得率为23.24±0.49 g/100g。2.测定3种提取方法红树莓籽油的理化指标。经气相色谱质谱联用仪分析3种提取方法红树莓籽油的脂肪酸组成。经液相色谱仪测定3种提取方法红树苺籽油中β-谷甾醇、α-生育酚含量。以3种提取方法红树莓籽油的得率、酸值、碘值、过氧化值、皂化值、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、饱和脂肪酸(Saturated fatty acid,SFA)、单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acid,MUFA)、多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)、不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acid,UFA)、籽油中 β-谷甾醇和α-生育酚含量为指标,通过主成分分析提取主成分,计算3种提取方法的综合得分,确定红树莓籽油的最佳提取方法。结果表明,高剪切-超声提取法提取红树莓籽油酸值、皂化值、过氧化值低,碘值高,共检测出19种脂肪酸,占红树莓籽油总成分的98.22%,其中亚麻酸和亚油酸分别为29.98%和48.07%;索氏提取法提取红树莓籽油中β-谷甾醇和α-生育酚含量高,分别为97.37 mg/100g和18.88 mg/100g。主成分分析共提取出2个主成分,方差贡献率分别为52.288%、47.712%。高剪切-超声提取法综合得分最高,其次为超声提取法和索氏提取法,因此高剪切-超声提取法为红树莓籽油的最佳提取方法。3.采用高剪切-超声提取法提取红树莓籽油,通过Schaal加速贮藏试验,探究红树莓籽油贮藏稳定性。以红树莓籽油贮藏过程中的过氧化值、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、SFA、MUFA、PUFA、UFA、籽油中β-谷甾醇和α-生育酚含量、DPPH和ABTS自由基清除率为指标,通过主成分分析提取主成分,计算权重。结果表明,红树莓籽油贮藏过程中过氧化值升高,棕榈酸、硬脂酸、SFA含量增加,油酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、MUFA、PUFA含量降低,籽油中β-谷甾醇和α-生育酚含量先降低后趋于平稳,DPPH和ABTS自由基清除率先降低后趋于平稳。主成分分析共提取出4个主成分,方差贡献率分别为63.230%、11.590%、9.855%、7.698%。其中SFA、α-生育酚、β-谷甾醇、硬脂酸、过氧化值、棕榈酸、花生酸、亚油酸、UFA、PUFA、ABTS自由基清除率、MUFA占红树莓籽油贮藏稳定性82.82%的权重,是红树莓籽油贮藏稳定性的重要指标。预测红树莓籽油于20℃条件下贮藏,其货架寿命为336 d。4.采用蛋白吸附法配制红树莓籽油样液,通过MTT试验得出红树莓籽油、H2O2诱导HepG2细胞适宜浓度。通过测定HepG2细胞存活率、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量和氧化有关酶活性如:超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px),评价红树莓籽油的抗氧化活性;通过测定HepG2细胞内脂质、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High density liptein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Chesterol,LDL-C)含量,评价红树莓籽油降血脂活性。结果表明,红树莓籽油诱导24 h HepG2细胞的上限浓度为0.284 g/L;H2O2诱导8 h HepG2细胞的建模浓度为0.8 mmol/L。试验组与模型组相比,细胞存活率升高了 49.34%、MDA降低了 75.18%、SOD升高了 32.18%、CAT升高了 156.28%、GSH-Px升高了 111.55%,且均存在极显著性差异,表明红树莓籽油能够降低细胞的氧化损伤;试验组与模型组相比,脂质含量降低了 14.10%、TG 降低了 50.76%、HDL-C 升高了 48.47%、LDL-C 降低了 28.89%,且均存在极显著性差异,表明红树莓籽油能够降低细胞内脂肪积累。